AASLD中國之聲 | 魏來教授團隊兩項C肝研究喜獲TOP10優秀壁報

編者按：

11月13日，第69屆美國肝病研究學會（AASLD）年會圓滿落下帷幕。期間，來自中國的研究在數量上較往年明顯增多，並且多項研究獲選大會「優秀報告」，反映出我國的肝病研究實力正不斷增強。其中，北京大學人民醫院、北京大學肝病研究所魏來教授團隊的兩項關於丙型肝炎臨床特徵和臨床結局的研究喜獲TOP10優秀壁報。現將其主要研究內容整理如下，以饗讀者。

魏來教授團隊

直接抗病毒藥物（DAAs）可以使90%以上的慢性丙型肝炎（CHC）患者達到持續的病毒學應答（SVR），但是對於基因3型CHC患者的SVR相對較低，尤其肝硬化患者，其SVR僅為80%。基因3型CHC患者對DAAs治療療效不佳的原因可能與耐葯相關替代（RASs）有關。本研究旨在分析未經DAAs治療的基因3型CHC患者NS5A區RASs，並評估全球基因型3型序列RASs存在的特點。

入組患者來自CCgenos研究的未經DAAs治療的90例基因3型CHC患者，包括37例基因3a型，53例基因3b型。採用兩種測序方法檢測RASs，一種是經巢氏PCR法擴增HCV NS5A目的片段序列後直接測序，一種是第三代PacBio RS DNA測序系統對目的片段進行深度測序。同時我們通過檢索GenBank，獲得568條HCV全基因組序列，包括540條基因3a型序列、12條基因3b型序列以及16條其他亞型序列。測序結果及檢索序列均與參考序列HCV標準株AF009606進行比對，在氨基酸水準分析NS5A抑製劑RASs（24，26，28，29，30，31，32，38，58，92，93）的特點。

結果顯示60%（54/90，60%）的CHC患者至少存在一個RAS，基因3b型出現RASs的頻率明顯高於基因3a型。37例基因3a型CHC患者中發現1例（1/37，2.70%）存在耐葯相關單個氨基酸替代位點A30K。53例基因3b型CHC患者中發現2例（2/53，3.77%）存在耐葯相關單個氨基酸替代位點A30K，50例（50/53，94.34%）同時存在A30K和L31M雙位點的RASs，未發現其他位點的RASs。我們通過GenBank檢索得到540條HCV全基因組序列，存在A30K和L31M雙位點的RASs見於除基因3a型外的17條（17/540，3.15%）其他亞型序列，包括11條3b型序列（11/12，91.67%），1條3d型序列（1/1，100%），3條3g型序列（3/4，75%），1條3i型序列（1/6，16.67%），1條3k型序列（1/1，100%）。

該項研究表明，NS5A區同時存在A30K和L31M雙位點的RASs主要見於基因3b型的CHC患者中。該雙位點RASs的同時存在可能是基因3型CHC患者難治的原因之一，值得進一步深入研究。

基因3型，尤其是基因3b型HCV感染與肝臟疾病進展風險增加相關

全球範圍內，基因3型（GT3）是HCV第二常見的基因型。與GT1和GT2患者相比，GT3型患者進展為肝硬化和肝細胞癌（HCC）的風險更高。在許多其他國家，基因3型以3a亞型為主，而在中國，基因3型包括3a亞型和3b亞型。因而，在此項全國性隊列研究（CCgenos研究，NCT01293279, NCT01594554）中，自2011年起進行5年隨訪，前瞻性觀察GT3，尤其是GT3b，與其他基因型相比對肝臟疾病進展影響的不同。

CCgenos研究隨訪期（NCT01594554）的隊列來自橫斷面研究（NCT01293279）的997例患者。這些患者為中國28家醫科大學附屬醫院納入的年齡≥18歲、抗-HCV陽性、HCVRNA定量陽性、干擾素或其他抗病毒治療初治的漢族患者。997例患者中的512例納入隨訪期研究，以觀察真實世界中的疾病進展和治療應答情況。疾病進展定義為發生如下一種或一種以上情況：基線無肝硬化、而隨訪期發生肝硬化，基線存在肝硬化、隨訪期Child-Pugh（CTP）評分增加大於等於2分，從代償期肝硬化進展為失代償期肝硬化，HCC，肝移植或死亡。

在本隊列中，58.5%（24/41）的GT3患者接受治療，14例接受聚乙二醇干擾素聯合利巴韋林治療，10例接受普通干擾素聯合利巴韋林治療。中位治療時間為47.5（34.5，52.5）周。GT3患者的SVR12為87.5%（21/24），GT3a患者SVR12為66.7%（6/9），GT3b患者SVR12為100%（13/13）。對498例患者用Kaplan-Meier曲線進行生存分析，其中，304例GT1，122例GT2，41例GT3（13例GT3a，26例GT3b），31例GT6。儘管GT3患者年齡小於GT1患者（平均年齡39.5歲vs.46.9歲），GT3患者疾病進展較GT1、GT2患者更快。GT3患者疾病進展早於GT1患者約10年（27.1年vs.35.6年）。GT3患者中，GT3b患者疾病進展風險更高。

綜上所述，基因3型，尤其是基因3b型HCV感染，與肝臟疾病進展風險增加相關。

真實世界中的中國丙型肝炎長期隨訪隊列的臨床結局和疾病進展：CCgenos觀察性研究數據報告

在中國，HCV感染造成了嚴重的疾病負擔。魏來教授團隊報導了漢族CHC初治患者隊列5年的觀察性研究隨訪數據，主要分析患者長期隨訪的治療結局和疾病進展。

研究長期隨訪隊列來自於CCgenos橫斷面研究，5年隨訪隊列從2012年開始，根據真實世界中的治療情況分為治療組和未治療組。未治療組每6個月進行1次隨訪，治療組每3個月隨訪1次，每次隨訪收集患者的臨床資訊並檢測其HCV RNA。疾病進展定義為：（出現以下一種或多種情況）：①基線無肝硬化患者在隨訪中出現肝硬化；②基線肝硬化患者隨訪中CTP評分升高2分及以上；③代償期肝硬化進展到失代償期肝硬化；④發生肝細胞肝癌（HCC）；⑤進行肝移植；⑥死亡。

該研究最終納入512例患者，其中340例（66.4%）患者接受干擾素為基礎的治療，24例（4.7%）患者接受直接抗病毒藥物（DAAs）治療，仍然有148例（28.9%）患者在5年隨訪中未接受治療。與治療組相比，未治療組中基線存在肝硬化患者比例更高。接受治療的整體人群的持續病毒學應答率（SVR24）為73.8%（234/319），而肝硬化患者的SVR24率僅為47.6%（20/42）。基因2型和基因3型患者的SVR24率分別為89.1%（82/92）和87.5%（21/24），均高於基因1b型患者（65% [117/182]）。

Kaplan-Meier生存分析曲線顯示，治療組患者進展為肝硬化的比率顯著低於未治療組（P=0.0030）。在HCC Kaplan-Meier生存分析結果顯示治療組與未治療組相比，沒有顯著性差異（P=0.9277，但治療組中的疾病進展有下降趨勢。在未治療組中可以發現，基因3型和基因6型的患者與基因1型和基因2型相比，出現總體疾病進展和HCC的比率更高（P＜0.0001）。基因3型和基因6型患者從HCV感染到出現疾病進展的中位時間比基因1型和基因2型的患者更短。Logistic回歸分析顯示，總體疾病進展與感染HCV的年齡、基線肝纖維化變化、基線APRI、FIB-4和EQ-5D評分顯著相關。

這項研究提示，在中國，獲得C肝更有效治療的需求仍未滿足，長期隨訪隊列研究證實仍有很大比例的患者未使用接受治療，並且接受干擾素為基礎治療的SVR24率仍然很低。隨著短療程、高療效、耐受性強的DAA治療方案的獲批，希望更多的患者能從HCV抗病毒治療中獲益。

1. The Presence of Resistance-Associated Substitutions （A30K+L31M） in DAA Treatment-Naive Patients with Genotype-3b HCV Infection. Abstract 1558

2. Hepatitis C Virus Genotype 3, Particularly 3b, Is Associated with an Increased Risk of Liver Disease Progression in China National Cohort with Multiple Genotypes. Abstract 1554

3. Real World Clinical Outcomes and Disease Progression of HCV Treatment-Naive Patients in China: An Analysis from the Ccgenos Study. Abstract 0694