摘要 桑椹為一種葯食兩用的水果，作為食品，其營養豐富，味甘甜；作為中藥材， 其藥理作用受到許多人的開發與研究，具有滋陰補血、清熱生津、延年益壽的功 效，治療失眠、便秘、耳鳴、鬚髮早白等癥狀。而多糖是其中可以發揮重要作用 的一種活性成分，是經過多個單糖脫水縮合而成的聚合物，具有抗氧化、降血脂 血糖以及抗炎活性等。本論文以桑椹鮮果為實驗對象，對其多糖進行提取分離、 純化以及結構鑒定。運用超聲波提取桑椹多糖的響應面實驗設計，從而達到優化 提取工藝的目的，通過優化條件，提取到大量桑椹粗多糖樣品，然後對桑椹粗多 糖進行分離純化，對其單糖組成進行了定性及定量研究，而後對純化的幾種桑椹 多糖進行體外抗氧化研究。為桑椹功能成分提取分離鑒定和桑椹產品標誌性成分 檢測提供參考，從而為桑椹多糖的進一步研究開發奠定一定的理論和實踐基礎。 實驗結果如下： (1)通過單因素試驗，選取最適合的條件對桑椹粗多糖進行響應面的工藝優 化設計，不同因素對於桑椹多糖提取率的影響程度強弱為：浸提溫度>超聲時間 >水料比>超聲功率，確定了優化的桑椹多糖提取工藝參數：浸提溫度為72℃， 超聲功率為106W，超聲時間為48 min，水料比為42：1(mL／g)，在此條件下， 桑椹多糖提取率達到8．41％。超聲提取後得到的粗多糖為分離純化的樣品。 (2)通過透析去除蛋白質和小分子物質，而後得到的桑椹粗多糖經纖維素 脫峰，分別對其進行濃縮，凍乾，並分別命名為MBP一1、MBP．2、MBP一3。對 ×1 典型的糖類物質，研究了它的主要官能團組成，吸收峰主要在3411、2926、1639、 糖組成結果表明，MBP．2主要是由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、 半乳糖組成的雜多糖，其摩爾比為：鼠李糖：阿拉伯糖：木糖：甘露糖：葡萄糖： 半乳糖=0．6：0．1：0．066：0．05：0．207：1．034。 (·OH)、超氧陰離子(02．。)有一定清除能力，而且有一定的還原力和螯合金屬離子 的能力。而且伴隨著品質濃度的增加，桑椹多糖在一定的範圍內，表現出來良好 萬方數據 西南大學碩士學位論文 的量效關係。:niuzhendbs）了解更多相關資訊。 由上可見，桑椹中含有一定的多糖，是一種多功效成分並存的優良的食物資 源，具有良好的開發前景。綜合利用桑椹，提高桑椹的經濟附加值，開發更多的 桑椹功能食品意義非凡。 關鍵詞：桑椹；多糖；工藝優化；成分分析；抗氧化活性 II 第1章文獻綜述 第l章文獻綜述 1．1桑椹的研究進展 1．1．1桑椹的概況 alba 桑椹又名桑果、桑實、椹子、烏椹等，系桑科植物MorusL．的成熟果實 …。呈長圓形，長1～2厘米，直徑6～10毫米，基部具柄，長1～1．5厘米。表 面紫紅色、紫黑色或是乳白色，在全國大部分地區均有生長，而江蘇、浙江、湖 南、四川、河北等地則是主產地。桑椹已經被國家衛生部列為既是食品又是葯 品的農副產品之一，作為傳統中藥材，桑椹具有補肝益腎、養血生津、滋液熄風、 潤腸通便的作用，主治肝腎陰虛、眩暈耳鳴、津液不足、血虛便秘、鬚髮早白、 內熱消渴、關節不利、神經衰弱等症。現代醫學亦表明，桑椹能夠在免疫調節、 抗氧化、抗癌和預防心腦血管疾病等方面發揮重要作用。 1．1．2桑椹的化學成分 桑椹的營養成分豐富，其含水量在80％以上，含有一定的粗纖維；粗蛋白含 量較高，為蘋果蛋白質含量的2．5倍；總酸度為0．97％，比一般水果高5～10倍。 吳祖芳等發現桑椹中含有19種氨基酸，包括七種必需氨基酸，19種氨基酸的含 量及種類見下表1．1；維生素c和礦質元素硒含量均較高。王艷輝等對桑椹的 營養成分研究，發現了桑椹中含有10種維生素，其種類和含量見表l一2。 表1-1桑椹中的氨基酸及其含量 Table1．1Aminoacidsanditscontentinmulberry 種類 含量(mg／1 種類 含量(mg／1009) 009) 賴氨酸 c；加 谷氨酸 24．01 蛋氨酸 M∞ 甘氨酸 2．76 苯丙氨酸 王蹠 丙氨酸 15．68 亮氨酸 Z坦 半胱氨酸 3_30 蘇氨酸 "剮 天冬醯胺 64．02 纈氨酸 孓加 組氨酸 9．93 異亮氨酸 1們 精氨酸 9．15 天冬氨酸 侈Ⅲ 脯氨酸 19．43 絲氨酸 12．46 谷氨醯胺 47．36 酪氨酸 桑椹中含有幾種主要功能性物質，白藜蘆醇是其中很重要的一種，其是一種 植物的次生代謝產物，一種重要的植物抗毒素，有降血脂、抑製癌細胞和治療心 血管疾病等功能。朱祥瑞等使用高效液相色譜法對桑椹果皮進行檢測，發現新 鮮的桑椹果皮中含有白藜蘆醇，它的品質比約為0．128mg／g，說明桑椹中含有一 定量的白藜蘆醇。黃酮類物質是一種植物次生代謝產物，是許多中草藥的有效 成分，具有抗癌、抗腫瘤、降低心血管疾病、減少脂質過氧化和防治骨質疏鬆等 功效。杜青平等利用三種方法對桑椹籽中總黃酮類化合物進行了提取和鑒定， 結果表明，桑椹籽中含有豐富的生物類黃酮，達到19．89mg／1009，除此之外，桑 21。 椹中還含有多種功能性物質，如花青素等【l 表l一2桑椹中含有的維生素及其含量 table1-2Vitaminanditscontentinmulberry 1．1．3桑椹的生理活性 1．1．3．1抗氧化活性 顧瑋蕾等對桑椹的抗氧化活性進行了研究，分別從還原力，對羥自由基的清 除率和抑製脂質過氧化的能力等角度研究了桑椹水提物的體外抗氧化活性，結果 顯示，桑椹水提物的還原能力的吸光度達到了O．8459，對羥基自由基清除率達到 31。 84．38％，對DPPH『清除率達到了70％，表明桑椹具有良好的體外抗氧化活性李麗等對桑椹果汁的抗氧化活性分析，對其DPPH自由基清除能力、鐵離子 的螯合力和羥自由基清除能力進行測定，當桑葚果汁品質濃度為10mg／ml時，其 DPPH『的清除率達到了83．84％，鐵離子螯合率為55．24％，羥自由基清除率則達到 了88．72％，，表明桑葚果汁有較強的抗氧化能力，具有很好的營養以及保健功能 。
1．1．3．2抗誘變作用 薑聲揚等用不同濃度的桑椹新鮮汁灌胃小鼠，然後取其骨髓細胞，並對其進 行染色體畸變以及微核試驗，結果發現隨著灌胃桑椹汁的濃度的增加，微核率逐 漸降低，抑製率逐漸升高，染色體畸變率則逐漸降低。表示新鮮桑椹汁具有一定 。 的抗誘變作用『1 1．1．3．3活血降脂作用 袁保紅等探討了黑桑椹果汁的活血降脂活性，通過對大鼠灌胃黑桑椹果汁， 檢測其血清和血液，結果發現其紅細胞膜MDA含量減少，紅細胞的超氧化物歧 化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物歧化酶(GSH．Px)、膜結合酶活性以及高密度脂蛋 白含量均增加，膜脂流動性得到改善及血液總固醇含量降低。表明了黑桑椹果汁 61。 含有一定的活血降脂性『1 1．1．3．4增強細胞免疫功能 顧洪安等通過製備桑椹混懸液對正常和陰虛模型小鼠進行灌胃，結果發現陰 虛模型中的小鼠的淋巴細胞增值率降低，NK細胞殺傷率增大以及IL．2誘生活性 增加。判斷桑椹混懸液能夠提高陰虛小鼠的淋巴細胞增殖能力、NK細胞殺傷率 以及IL．2誘生活性，從而增強其免疫功能，從細胞免疫功能方面探討桑椹滋陰作 用的機理。 1．2植物多糖的研究進展 物，分子結構複雜，分子量可能達到數萬或者數百萬以上。在機體的生命活動 中發揮著重要的作用，這些生物過程包括細胞間能量傳遞、胚胎的發育、細菌和 病毒感染以及體液和細胞免疫等。因此，多糖、蛋白質、維生素以及脂類一起構。 成生命系統的四大基本物質『1 多糖已經在醫藥、生物材料、食品和生物燃料等方面得到廣泛應用，今後將 會有更多、更深入的研究，使多糖得到更加廣泛的應用。 1．2．1植物多糖概況 多糖廣泛存多糖廣泛存在於植物、動物和微生物中，按照多糖來源，可以分 為植物性多糖、動物性多糖和微生物多糖等幾類。 3 植物多糖是從植物的根、莖、葉、果實、花、種子中提取的多糖，這些提 取的多糖一般是水溶性多糖和樹膠(阿拉伯膠、瓜爾膠等)等。其分子量從幾千 到幾百萬(Da)不等，主要單糖組成有葡萄糖、果糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、 鼠李糖、甘露糖等，此外還含有由伯羥基被氧化成羧基後形成的糖醛酸。 在中醫學中，植物作為傳統中草藥，經常被用來治療各種不同的疾病，現代 藥理學試驗表明，中草藥中發揮關鍵作用，主要是低分子量如生物鹼，萜類，黃 酮類，皂甙；高分子品質如蛋白質、單寧酸以及最重要的多糖。在中草藥中， 多糖是具有生理活性的成分之一，具有免疫調節、抗病毒、抗氧化、抗腫瘤、抗 。 輻射、抗疲勞以及保肝等作用【2 1．2．2植物多糖生理活性 1．2．2．1植物多糖清除自由基能力 自由基是機體氧化反應產生的有害化合物，其具有強氧化性，可損害機體細 胞和組織，隨著人們對多糖的研究逐漸加深，發現許多從植物中提取到的多糖類 化合物都具有提高抗氧化活性、清除自由基的功效。JieGao等從百合中提取部分 多糖，對其進行抗氧化活性研究，結果表明，百合多糖能清除DPPH自由基和羥 基自由基，並且其清除能力與多糖的品質濃度具有明顯的量效關係。Zhan—Yi Zhao等對從澤瀉中提取到的3種多糖進行抗氧化反應，結果表明澤瀉多糖含有清 除DPPH、羥自由基和超氧陰離子自由基的能力。 1．2．2．2植物多糖調節免疫活性 機體免疫調節是通過機體免疫系統實現的，機體免疫系統通過免疫應答和分 泌免疫分子的手段來達到免疫調節的目的，即抵製外源性病原體入侵，從而維持 整體功能平衡。多糖是構成生物體結構的重要結構部分，其可以通過對免疫細 胞(T淋巴細胞、B淋巴細胞及巨噬細胞等)的調節，對細胞因子的影響，對免 疫器官的影響，對補體系統的影響來發揮免疫調節的作用。 1．2．2．3植物多糖降血糖活性 高血糖是糖尿病病人的主要病理性特徵之一，會影響人類健康，隨著對多糖 的生物活性的大量研究表明，多糖對正常小鼠和高血糖小鼠均有降血糖作用，有 的多糖通過刺激胰島素的分泌，促進血糖轉化成甘糖。Yao Zhang等研究了桑 葉多糖的降血糖活性，對鏈脲黴素(STZ)弓I起糖尿病的大鼠進行桑葉多糖的灌胃， 以灌胃量與小鼠體重比例為50～200mg／kg的計量對大鼠進行長達5周的灌胃，對 其血糖指數進行測定，發現指數越來越低，說明桑葉多糖具有降低血糖活性的功 。 1．2．2．4植物多糖抗腫瘤活性 具有抗腫瘤活性的植物多糖主要是通過激活機體的免疫系統，誘導分化，刺 激造血，抗轉移，抗新生血管生成以及誘導NO產生等方式來增強機體的免疫功 能間接抑製或殺死腫瘤細胞。楊全等研究了桑黃胞外多糖對小鼠S180實體瘤、 腹水瘤的生長抑製作用，對接種S180實體瘤或腹水瘤後的小鼠進行隨機分組， 分別灌胃不同劑量的桑黃胞外多糖，結果發現桑黃胞外多糖能夠顯著增加患瘤小 鼠的脾臟指數和胸腺指數，能夠很大程度的抑製瘤的生長，並且降低分裂指數， 延長小鼠的存活時間，表明桑黃胞外多糖具有較強的抗腫瘤作用。Danyan Zhang等從砂仁中提取到的多糖並研究了其生物活性，砂仁中部分多糖對肝癌細 51。 胞的生長有一定的抑製作用『3 1．2．2．5植物多糖的其他活性 此外，最近這幾十年對多糖的研究不斷深入，多糖的生理活性得到更大程度 的發現，它還具有抗衰老，抗凝血，降血脂，抗疲勞，保肝，抗炎，抗菌，抗病 毒，抗輻射，抗潰瘍和抗寄生蟲的作用四。 1．2．3植物多糖的提取方法 植物多糖廣泛存在於各種植物組織以及細胞內部，因此如何高效快速的提取 植物多糖成為多糖研究的必要，研究出一種高效的多糖提取工藝，對進一步研究 多糖的結構功能都是極為重要的。目前，根據植物多糖的性質和提取技術，主要 分為熱水提取、超聲波輔助提取、酶輔助提取、微波輔助提取和亞臨界水萃取等 幾類提取方法。 1．2．3．1熱水浸提法 熱水浸提法一般是採用水作為溶劑，是多糖提取的最常用的方法，根據相似 相溶原則，多糖是極性大分子化合物，水是典型的強極性溶劑，對原料的穿透力 較強，利於提取，不需要特殊的設備且生產成本低，生產風險小…。然而其雖然 具有上述優點，但是也有一定的缺陷，即，提取效率低、耗時且提取不完全等。 Chun．LinYe等利用熱水浸提法提取車前草的多糖，利用響應面法優化提取方法， 測得車前草多糖提取率為4．37％t421。 1．2．3．2超聲波輔助提取法 超聲波的振動頻率超出了人類的聽覺範圍(1．16KHZ)，它是一種在媒質中進 行穿插的機械振動，在傳播過程中，超聲波和媒介相互作用，可以使超聲波的幅 度和範圍等發生一定的變化，同時媒質的組成、狀態、結構和功能等也發生了一 定的變化。通常所說的超聲波是指頻率在20kHz以上的聲波。聲波與電磁波 (如無線電波、紅外、X．射線等)有著本質上的差異，後者可以通過真空，而前者 必須藉助於介質進行傳播。 超聲波輔助提取法被廣泛的應用於樣品的提取分離，其能促進與樣品不相溶 的物質的快速釋放，以達到快速提取的目的，其提取時間短，提取效率高，節約 成本，操作簡單，減少了樣品的浪費，更多的得到目地產物，在超聲功率足夠低 的條件下，能保證多糖的結構不被降解和破壞，是一種有效的可靠的多糖提取方 法。H81。Zlli Ying等比較了超聲波輔助提取、微波輔助提取、熱水浸提三種方法 提取桑葉中的多糖的提取率的大小，均採用響應面設計並分析，結果發現超聲波 輔助提取，桑葉多糖的提取率達到10．79％，大於微波輔助提取率9．53％，遠遠大 於熱水浸提的提取率4．67％；超聲時間只需要20min，遠遠低於熱水浸提85min。 1．2．3．3酶法輔助提取法 酶法多糖的輔助提取是挺溫和且高效的多糖提取方法。酶在多糖的提取過程 中起催化劑的作用，利用酶來破壞植物的細胞壁，從而改變細胞膜的通透性，加 速了存在於植物中的多糖的溶出，從而提高了提取率和提取效率。由於酶的作用 條件溫和，所以大大降低了提取條件。常用的酶有蛋白酶、纖維素酶和果膠酶等 。夏平等利用複合酶(果膠酶：纖維素酶=1：1)法提取桑葉多糖，在PH4．5，50℃， 酶用量1％，60min條件下，得到桑葉多糖最佳得率14．32％。 1．2．3．4微波輔助提取法 的形式傳播，作用原理是通過穿透生物質體，，從而與生物體中的水等極性分子發 生相互作用產生熱。微波輔助提取(microwave．assistedextraction，MAE)是一種 利用微波來提高提取效率的新技術。微波在傳輸過程中遇到不同的物料會依物料 性質不同而產生反射、穿透、吸收現象。在快速振動的微波電磁場中，被輻射的 極性物質分子吸收電磁能，以每秒約4．9x109的頻率高速振動，迅速產生大量熱 能。而在微波提取過程中，微波隻對所有的樣品和溶劑同時均勻地加熱而不會加 熱提取容器，因此料液會快速升溫而沸騰，目標物在短時間內從母體中進入溶劑 Zhao等利用微波輔助法提取蘭州百合多糖， 中，從而縮短提取時間。Baotang 通過實驗得出在597W微波處理60min，多糖含量可達36．55％。微波輔助提取已 4I。 經成為多糖提取的一種重要的提取方法。此外，有稀鹼提取法，酸浸提法，亞臨界萃取法等多種方法，這些方法各有 其特點，需根據多糖的性質來確定多糖的提取方法。 1．2．4植物多糖的分離純化 1．2．4．1多糖的分離 將粗多糖中含有的低聚糖、蛋白質、色素、無機鹽及小分子有機物等雜質去 除的過程就稱為多糖的分離『551。多糖粗提取後，首先就應該分離多糖，除去其中 的雜質。 (1)脫蛋白 植物多糖粗提物中含有一定的蛋白質，對於提取液中的蛋白質一般選用只能 使蛋白質沉澱而目標物並不沉澱的化合物來處理。目前，常用的脫蛋白的方法包 括Sevag法、三氯乙酸法、三氟三氯乙烷法及酶解法等。 在以上方法中，Sevag法是最常用的脫蛋白方法，利用蛋白質與Sevag試劑 達到等電點沉澱的原理，將提取液與Sevag試劑混合，離心即可除去蛋白質。Sevag 法反應條件溫和，反應過程中多糖不會發生變性。但該方法要重複沉澱多次，才 能除盡多糖中含有的蛋白質，多糖的損失量也挺大。 三氯乙酸法是在冰浴條件下，向多糖溶液中慢慢加入三氯乙酸溶液，攪拌， 直到溶液的PH值為1，提取液不再發生渾濁，而後低溫下放置4h，離心，除去 沉澱物質，得到不喊蛋白質的多糖溶液。三氯乙酸法操作簡單，效率高，但是反 應較為強烈，會引起某些多糖降解。 三氟三氯乙烷法是將三氟三氯乙烷試劑等體積加入到多糖溶液中，攪拌 10min，離心收集上層的的水層，再用上述試劑處理上述水層溶液幾次，直到得 到不含蛋白的多糖溶液。該方法效率較高，但因三氟三氯乙烷試劑沸點相對較低， 容易揮發，不宜大量應用。 酶解法即為用蛋白酶酶解蛋白，是常用的從組織細胞中釋放出多糖的方法， 通常蛋白酶的選擇是關鍵，一般均選用專一性較低的蛋白酶，其能夠對大多數的 蛋白質進行水解。比較常用的酶有胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、鏈酶蛋白酶。 (2)脫色 植物多糖中常常含有一些色素，依據色素性質的不同，選用不同的方法以除 去色素。目前常用的多糖除色素方法有活性炭吸附法、過氧化氫法【611和大孔吸附 樹脂法。活性炭吸附法除色素效果較好，但脫色時間較長，多糖的損失量也較 大，並且活性炭難以去除。過氧化氫法是採用過氧化氫氧化脫色，由於過氧化氫 具有氧化性，可能會破壞多糖的結構影響其生理活性。大孔吸附樹脂脫色是利用 其吸附作用，脫色後多糖保留率高，有一定的脫蛋白效果，大孔吸附樹脂是採用 特殊的有機高聚物作為吸附劑的樹脂，其不僅具有吸附作用，而且還有分子篩作 用。而缺點則是對某些色素的吸附效率低。 (3)低聚糖、無機鹽等雜質的去除 透析法是除去低聚糖、無機鹽等小分子物質常採用的方法。其是依據被分離 物質的分子量大小不同來進行分離的。由於低聚糖、無機鹽等物質分子量較小， 可以通過透析膜除去，多糖分子量較大，則留在膜內，從而達到分離的目的。 1．2．4．2多糖的純化 多糖經提取和分離後，得到的粗多糖是多種多糖的混合產物，因此需對粗多 糖進行分級分離得到純品。常用的多糖純化方法主要有分級沉澱法、季銨鹽沉澱 法、柱層析法、超過濾法、鹽析法以及金屬絡合物法等。分級沉澱法是根據 不同的多糖在不同濃度的低級醇或酮中溶解度的不同進行分離的，分級沉澱法適 用於分離溶解度差異較大的多糖。季銨鹽沉澱法是利用季銨鹽可與酸性多糖陰離 子形成沉澱，而中性多糖保留在原液中進行分離，通常分子量大或酸性強的酸性 多糖會先沉澱下來。柱層析是多糖單一組分純化的重要手段，常用的柱分離方法 是離子交換柱層析法【683和凝膠柱層析法。離子交換柱層析法主要用於分離中性 多糖和酸性多糖，是根據多糖的吸附力和極性的不同，使用不同的洗脫劑對多糖 進行洗脫，從而達到分離的目的。 1．2．5植物多糖的純度鑒定及相對分子量的測定 多糖屬於高分子化合物，其化學結構較為複雜，因此其純度不能用傳統化合 物的純度來衡量，一般情況下，統稱的多糖純品指的是一定範圍內分子量均一的 組分，因此，多糖相對分子量成為研究多糖性質的重要指標，其具體測定方法見 表1．3。多糖的純度對其結構的研究是至關重要的，因此必須要對分離所得的多 糖進行純度鑒定。常用的多糖的純度的鑒定方法主要有：凝膠柱色譜法、光譜掃 描法、高壓電泳法、旋光測定法和超離心法。在理論上，我們至少要通過兩種方 法才能確定多糖的純度。然而實際上，多糖的純度一般可以通過凝膠柱色譜法確 定，根據多糖的吸光度的洗脫峰形判斷純度，若峰形單一、對稱，則為均一性多 糖。1．2．6多糖的結構表徵 多糖是一類分子量大，結構很複雜的化合物，多糖複雜的結構與其生物活性 之間存在著密切的關係。多糖與蛋白質、核酸的結構分類相似，多糖的結構被 分為一級結構、二級結構、三級結構和四級結構，而後三種結構則被統稱為高級 結構。一級結構以及高級結構的組成。 表1-4多糖一級及高級結構的組成方式【7 Table1-4The of andadvancedstructureof compositionprimary polysaccharides 結構 組成 糖基的組成、排列順序及相鄰糖基的連 一級結構 接方式、異頭碳構型及糖鏈有無分支、 分支的位置與長短等 多糖主鏈間以氫鍵為主要次級鍵而形成 二級結構 的有規則構象 以多糖的二級結構為基礎，多聚鏈以非 三級及四級結構 共價鍵結合在太空內形成的有規則的構 象。 多糖的結構分析方法有很多，可分為化學分析法、儀器分析法和生物學分析 法。將多種檢測資訊進行合理的整理和全面的分析才能從中推斷出較為準確的多 糖結構資訊。現介紹幾種現在比較常用的多糖結構鑒定實驗方法。 1．2．6．1甲基化反應 甲基化分析方法是確定糖鏈中糖基間的連接位置的常用的方法。待分析的 多糖的單糖殘基的遊離羥基通過與試劑反應生成甲氧基。之後將多糖完全水解， 而後乙醯化，檢測乙醯基的位置，判定糖殘基的連結方式。 1．2．6．2高碘酸氧化和Smith降解 多糖結構中的連二羥基和三羥基結構可以被高碘酸氧化『7引，生成相應的多糖 醛和甲酸。一分子高碘酸氧化一個C．C單鍵。通過該定量反應可以推測多糖中糖 苷鍵連接方式、糖苷鍵的位置和聚合度等多糖結構相關資訊。為了避免超氧化反 應的發生，高碘酸氧化反應條件必須得到嚴格控制。 高碘酸氧化產物經過還原反應後，後進行完全酸水解反應，經過衍生化反應 後開始上機分析。這個過程就是Smith降解。根據其降解產物來獲得多糖的結 構資訊。 1．2．6．3紅外光譜分析 紅外光譜分析技術是利用多糖在紅外吸收光譜中的特異性吸收來對多糖的結 zkq20150924 構進行分析判斷。當用頻率連續變化的紅外光照射多糖分子時，一些特定頻率的 光會被多糖分子吸收，據此可以對多糖的糖環形式、異頭碳構以及其他多糖的特 征基團進行判蝌。 1．2．6．4質譜技術(MS) 質譜法是通過將檢測樣品轉化為運動的氣態離子，並通過質荷比(m／z)大小從而 起到分離作用的一種分析方法，所得結果以圖譜表達，即所謂的質譜圖。根據質 譜圖可以進行定性和定量分析、複雜化合物的結構分析、各種同位素比的測定及 固體表面的結構和組成分析等。離子源是質譜儀的心臟，其可以被看作是一種比 較高級的反應器，檢測樣品在其中發生一系列的特徵降解反應，反應在很短時間 內發生，從而可以快速獲得質譜，其主要種類包括電子電離源(EI)、正負化學電 光解吸電離源(MALDI)等，通過樣品的不同特徵，選擇特定的離子源。質譜儀 還含有品質分析器，其位於離子源和檢測器之間，按照不同方式將樣品離子按質 荷比(m／z)分開。而其主要類型有：磁分析器、飛行時間分析器、四極濾質器以 及離子阱等。通過質譜法，能夠檢測出多糖中單糖組成及佔有的含量比，其是常用的多糖 定性和定量分析技術。 1．2．6．5核磁共振(NMR) 核磁共振(NMR)是一種針對高純度多糖類物質結構鑒定技術，能夠提供更 檢測器結合起來，組合成更加高效的分析工具。LC-NMR技術的靈敏度低、昂 貴的設備和分析時間長，但是它能夠在線提供高價值的多糖類化合物結構資訊， 在應用於多糖類化合物的發展前景巨大。 zkq20150924 第2章引言 2．1立題思路 桑椹是一種被衛生部列為「既是藥品又是食品」的農副產品，其味香甜可口， 營養豐富，含有維生素、氨基酸、矢車菊．3一葡萄糖苷等花青素、蘆丁等類黃酮、 綠原酸等。
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