B肝初期模型開發，人源化NSG-PiZ小鼠，成本不足市售十分之一_研究人員_肝髒_cccDNA

新藥研發過程中的3期臨床試驗，人們即便沒有深入了解也常常聽到。當然，在進入3期臨床試驗前還有許多準備工作，例如在動物模型中取得的實驗數據。這時對研究人員而言，開發一種了解研究藥物適合的動物模型，在新藥臨床前階段就顯得至關重要。

B肝初期模型開發，人源化NSG-PiZ小鼠，成本不足市售十分之一

一、研究背景

在HEP DART 2021大會上，美國華盛頓州西雅圖市福瑞德·哈金森癌症研究中心疫苗和傳染病科研究人員帶了一項臨床前動物模型開發進展。研究人員介紹，此前研究了一種用於B肝病毒（HBV）治療的基因編輯方法，該方法使用腺相關病毒 (AAV) 載體介導的 SaCas9 遞送來靶向肝髒人源化 FRG 小鼠中的 HBV cccDNA。

但是，以往科學界發現，如果需要進一步研究上述潛在方法，會受限於人源化FRG小鼠的成本問題。在本研究中，研究人員展示了HBVDNA基因編輯創新思路，開發了一種新的人源化NSG-PiZ小鼠模型。

二、研究方法

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研究人員在實驗室建立了肝髒人源化 NSG-PiZ 小鼠模型，並評估了其對 HBV 複製的允許性。NSG-PiZ 小鼠易於人源化，僅需要在脾內人肝細胞移植前通過注射肝毒劑進行預處理，無需大量飼養。值得注意的是，NSG-PiZ 小鼠的人性化成本不到市售人源化 uPA-SCID 和 FRG 小鼠的 1/10，使學術研究人員負擔得起。

研究人員為 NSG-PiZ 小鼠移植了人肝細胞，並獲得了與 uPA-SCID 和 FRG 小鼠相當的植入水準，通常在十周內達到 1-10mg/mL 的 hAlbumin 水準。重要的是，人源化 NSG-PiZ 小鼠完全允許 HBV 感染。用基因型 D 臨床 HBV 分離株攻擊的 NSG-PiZ 小鼠已被追蹤 24 周，傳染性病毒可以通過小鼠依次傳代。病毒血症水準與 hAlbumin 水準相關，並在 109 IU/mL 以上達到峰值。

HBV+ 小鼠分泌 HBsAg，在 10 周時達到峰值，並在 hCK18+ 人肝細胞中表達 HBsAg，表明在人源化肝髒中發生了物種特異性複製。在屍體剖檢時，通過 ddPCR 檢測 hRPP30 和 mRRP30 以及肝髒相關的總 HBV DNA 和 cccDNA 來量化肝髒嵌合現象。然後進行了一組實驗來證明 NSG-PiZ 模型適用於 HBV 治療的研究。

首先，研究了 RTi 恩替卡韋 (ETV) 對 HBV 複製 +/- 衣殼組裝抑製劑環吡酮 (CPX) 的影響，以確定療效並確定聯合治療是否提供了附加的抗病毒作用。在病毒性 NSG 中跟蹤病毒載量 -PiZ 小鼠持續六周，包括四周的 ETV 或 ETV/CPX 治療，然後是兩周的無藥物治療以確定單一或聯合藥物治療的效果。用 ETV 治療的小鼠在 4 周內病毒載量減少了大約 3 個對數級，並在 ETV 停用後反彈。這個級別抑製作用與在 HBV+ uPA-SCID 或 FRG 小鼠中觀察到的相當。

ETV/CPX 聯合治療對單獨用 ETV 治療的小鼠沒有額外的影響。最後，確定了 AAV 載體是否可以在 NSG-PiZ 小鼠中有效地轉導 HBV+ 人肝細胞。 HBV+ NSG-PiZ 小鼠被施用表達 GFP 的嗜肝 AAV3B 或 AAV.LK03 載體，並在28 天后在嵌合肝髒中分析基因轉移。兩種載體都轉導人和小鼠肝細胞，以及 HBV+ 人肝細胞。

三、研究結論

綜上所述，研究人員給出本研究結論，結果表明，肝髒人源化 NSG-PiZ 小鼠模型支持HBV複製，可用於監測抗病毒小分子療法的療效。它們似乎也非常適合研究針對 HBV cccDNA 的 AAV 介導的抗病毒療法。

小番健康結語：我們簡單梳理一下，美國福瑞德·哈金森研究人員在HEP DART 2021大會展示的這種人源化NSG-PiZ小鼠模型，它支持全球B肝抗病毒療效的研究。研究人員早期曾經運用了基因編輯技術在動物實驗中靶向肝人源化FRG小鼠的cccDNA，因為人源化FRG小鼠開發成本問題，限制了進一步研究。

為了讓學術研究人員在經濟方面負擔得起，福瑞德·哈金森研究人員開發了NSG-PiZ小鼠模型，這種動物模型的成本只有市面上人源化 uPA-SCID 和 FRG 小鼠模型的十分之一。這種動物模型的意義在於，可用於評價慢B肝在研新藥在早期小分子階段的有效性，此外，對具有靶向cccDNA潛力的抗病毒新療法，這種新模型也適用。返回搜狐，查看更多

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