蛋白桑：桑葉輔助降血糖的實驗研究

摘要 目的 研究桑葉對小鼠 的輔助降血糖功能 。 方法 給予成年雌性小鼠四氧嘧啶 ( 45 m g /k gi V ) 建立高血 糖模型 。 篩 選高血糖模型動物 40 隻 ( 尾血血糖值在 10 ～ 25 m mo l /L 範圍內 ) 隨機分 4 組 , 每組 10 隻 , 以 0. 1、 1. 0、 3. 0g /( k g ·d ) 設定劑 量 , 灌胃量為 0. 02 m l /( g · d ) , 對照組給予同體積溶劑蒸餾水 , 連續灌胃 30 d 後比較各組空腹血糖及糖耐量值 。 結果 3. 0 g /( k g ·d ) 劑量組桑葉咀嚼片對正常小鼠體重及空腹血糖值未見影響 ; 1. 0、 3. 0g /( k g ·d ) 劑量組能明顯降低四氧 嘧啶高血 糖模型小鼠空腹血糖值 、升高其空腹血糖下降率並降低給予葡萄糖後 0、 0. 5、 2. 0h 的血糖 曲線下面 積 , 與對 照組比較 , 差異 均有統計學意義 。

結論 桑葉 具有輔助降血糖功能 。 關鍵詞 桑葉 ; 小鼠 ; 血糖 ; 四氧嘧啶

桑葉為 桑科落葉性多年木本植物桑樹 ( Mo r u s a l b aL ) 的葉 , 我國富產 , 葯食兩用 。 將桑葉作為治療 消渴症 的中藥 應用於臨 床 , 在我國的許多 古典醫 葯著 作中 早有 記載 。 近 年來 , 各 國研 究人員對桑葉的 組成 、功 能和作 用機 製進行 了系 統的 研 究 , 發現桑 葉中含有豐富的氨基酸 、纖維 素 、維 生素 、礦物質 以及多 種 生理 活性物質 , 具有 降血 糖 、降 血壓 、降 血 脂 、延緩 衰老 等多 種 保健 功效 。 已有 文獻分 別報 道桑葉 中多 糖 、生物 鹼 、黃酮 等 組分 , 有降血糖活性 。 楊雨等 也發現 桑葉多糖組 分 、桑 葉 生物 鹼組分都可降低 糖尿 病小鼠 的血 糖 , 促進 肝糖 合成 , 增 加 肝糖 原 , 增強糖尿病動物糖的貯 藏能力 。 我們 對以桑 葉提取 的 黃酮 和粗多糖加糯米 為主 要原料 製成 的保健 食品 咀嚼 片進 行 932 了小鼠輔助降血糖研 究 。 1材料和方法 職業與健康 。 見表 1。 2. 2桑葉咀嚼片對 四氧 嘧啶 高血糖 模型 小鼠 增重 、空 腹血 糖 值及 空腹血糖下降率 的影 響 經 口給 予四氧 嘧啶 高血 糖模 型 小 鼠不 同劑 量的 桑葉 咀嚼 片 30 d , 各劑 量組 與對 照組 增重 比 較 , 差異無統計學意義 ( P>0. 05) ; 禁食 5 h 空腹血糖 值各劑 量 組空 腹血糖均低於對 照組 , 且 高劑量 組與 對照 組比 較 , 差異 有 統計 學意義 ; 各劑量 組空 腹血 糖下降 率均 高於 對照 組且 高 、中 劑量 組與 對照 組 比 較 , 差異 有 統 計 學 意 義 ( P< 0. 05 或 P< 0. 01) 見表 2。 以上結果說 明桑葉咀 嚼片有 降低 四氧嘧 啶高 血 糖模 型小鼠空腹血糖值及升高其空腹血糖下降率作用 。 2. 3桑葉咀嚼片對四氧嘧啶高血糖 模型小鼠 糖耐量 的影響 從表 3 可見 , 糖耐量試驗中 , 各劑 量組小鼠 給葡萄 糖 0、 0. 5、 2 h 的血糖值均低 於對照組 。 給予葡萄糖後 0 h 的血糖值高劑量 組 與對 照組比較 , P<0. 05。 給葡 萄糖後 0. 5 h的血糖值高 、中 劑 量組 與對照組比較 , P<0. 01。 給葡萄糖後 2 h 的血糖值高劑量 組與對照組比 較 P<0. 01; 中劑量組與對照組比較 , P<0. 05; 低 劑量 組各 時間 點 與 對 照 組 比 較 , 差 異 均 無 統 計 學 意 義 ( P> 0. 05) 。 各劑量組小鼠給葡萄糖後 血糖曲線 下面積均 低於對 照 組 , 且高 、中劑 量組與對照組比較 , 差異有 統計學意 義 ( P<0. 01 和 P< 0. 05) 。 試驗結果表明, 桑葉咀嚼片糖耐量試驗結果 陽性 。

3結論 經口給予小鼠桑葉咀嚼片 3. 0、 1. 0、 0. 1g /( k g · d ) 連續 灌 胃 30 d , 3g /( k g ·d ) 組對正常小 鼠體重 及空腹 血糖值 無影響 ; 對四 氧嘧啶高血糖模型小鼠有升高空 腹血糖下 降率 、降低空 腹 血糖 值及 降低給 予葡 萄糖後 0、 0. 5、 2 h 血 糖曲線 下面 積的 作 用; 1g /( k g ·d ) 劑量能升 高四 氧嘧 啶高 血糖 模 型小 鼠空 腹 血 糖下 降率 , 降低 給予 葡萄糖 後 0、 0. 5、 2 h的血 糖曲 線下 面積 。 依據 《保健食品檢驗與評價技術規範 》 2003 年版 , 保健食品功能 學評 價程式與 檢驗 方法 規 范 , 第二 部 分功 能 學評 價 檢驗 方 法 三 、輔助降血糖功能 檢驗 方法 的判定 標準 , 判 定該 樣品 具有 輔 助降 血糖功能 。 桑葉中含有 豐富 桑葉黃 酮 , 其含 量高 達 0. 033 g /g , 同時含 有 豐 富 的 黃 芪 甙 、異 槲 皮 甙 、 東 莨 菪 甙 、 茵 芋 甙 等 。 黃酮具有清除自由基作用 , 對保持胰島 B細胞的結構 完 整 、維持正常的生理功能有著重要作用 。 桑葉是國家衛生部 1. 1 樣品 草綠色 桑葉 咀嚼片 , 試 驗前用 微型 萬能 粉碎 機粉 碎備用 。

1. 2 實驗動物 選用吉林大學基礎醫 學院動 物實驗 中心提供 的清 潔級 I C R雌性 小鼠 24 ～ 28 g , 生產許 可證 號 : S C X K ( 吉) 2003 -0001。 本動物室為清潔級 。

1. 3 劑量選擇 以 0. 1、 1. 0、 3. 0g /( k g ·d ) 設定 劑量 , 灌胃量 0. 02 m l /( g ·d ) , 對照 組 給 予 同 體 積 溶 劑 蒸 餾 水 , 連 續 灌 胃 30 d 。

1. 4 主要儀器與 試劑 O n eT o u c hH o r i z o n 隨手測 型血糖儀及 血糖試紙 ( 美國強生公司 ) ,S a r t o h u s B L 600 電子天 平 。 四氧嘧 啶( 美國 S i g m a 公司 ) 。 1. 5 實驗方法 1. 5. 1降低空腹血糖實 驗 1. 5. 1. 1正常動物空腹降糖試驗 按 實驗前禁食 5 h ( 自由飲 水) 的尾血血糖值分為對照組和受試樣品組 〔給予 3 g /( k g ·d ) 受試物 〕, 每組 10 隻 , 比較 2 組實驗 30 d 後空腹血糖值 。

1. 5. 1. 2四氧嘧啶高血糖模型 小鼠空 腹降糖 試驗 ①建立高 血糖模型 : 50 隻小鼠禁食 24 h , 給予四 氧嘧啶 ( 45 mg /k gi v ) , 7 d 後 禁 食 5 h測定 尾 血血 糖 。 ② 降 糖 試驗 : 選尾 血 血 糖 值在 10 ～ 25 m m o l /L 範圍內高 血糖模型動 物 40 隻 , 按 血糖值 分為模 型對照組和 3 個 劑量 組 。 比較 實驗前 後各 組小 鼠血 糖值 及血 糖下降百分率 。

1. 5. 2四氧嘧啶高血糖 模型動物糖耐 量實驗 上述 降糖試驗 結束 , 各劑量組給予 不同 濃度受 試樣 品 , 模 型對 照組 給予 同體 積蒸餾水 , 15 m i n 後經口 給予 2. 0g /k g 葡萄糖 溶液 , 取 尾血測 定給葡萄糖後 0、 0. 5、 2 h 的血 糖值 , 觀察各 組在給 葡萄 糖溶液 後各時間點血糖曲線 下面積的變化 。

1. 6 實驗數據 採用 S P S S 10. 0 軟 件對所 測的數 據用 方差分 析進行統計 。

2結果 2. 1 桑葉咀嚼片對正常小鼠增重及空 腹血糖 值的影 響 經口 給予正常小鼠 3 g /( k g ·d ) 桑葉咀嚼片 30 d , 受試樣品 組 ( 高劑 量) 小鼠增重及動物空 腹血 糖值與 對照 組比較 , 差 異均 無統計 表 1 桑葉咀嚼片對正常小鼠增重及空腹血糖值的影響 劑量組 [g /( k g . d ) ] 動物數 ( 隻) 10 10 試驗前體重 25. 9± 1. 04 25. 6± 1. 00 體重 ( g ) 試驗後體重 37. 8 ±0. 83 37. 4 ±0. 94 試驗後增重 11. 9± 1. 06 11. 8± 1. 19 P 1 值 0. 845 空腹血糖值 ( m m o l /L ) 試驗前 5. 42 ±1. 07 5. 54 ±0. 92 試驗後 5. 64 ± 0. 82 5. 32 ± 1. 10 P 2 值 0. 471 0 3. 0 表 2桑葉咀 嚼片對四氧嘧啶高血糖模型小鼠增重及空腹血糖的影響 劑量組 [g /( k g . d ) ] 動物數 ( 隻 ) 試驗前體重 10 10 10 10 25. 7± 1. 05 25. 6± 0. 96 25. 5± 1. 06 26. 1± 1. 17 體重 ( g ) 試驗後體重 37. 0 ±1. 86 37. 1 ±1. 08 37. 2 ±0. 96 37. 2 ±0. 74 試驗後增重 11. 4 ±2. 33 11. 5 ±1. 39 11. 7 ±1. 67 11. 1 ±1. 44 0. 819 0. 684 0. 703 P 1值 空腹血糖值 ( m m o l /L ) 試驗前 19. 71 ± 3. 42 19. 30 ± 3. 98 19. 16 ± 3. 67 19. 76 ± 3. 15 試驗後 22. 82 ±4. 01 20. 97 ±4. 70 19. 47 ±3. 84 18. 53 ±3. 31 0. 307 0. 069 P 2值 空腹血糖 下降率 ( %) 16. 34 ±14. 03 8. 48 ±7. 14 P 3值 0 0. 1 1. 0 3. 0 0. 139 0. 000＊ ＊ 2. 89 ±16. 18 0. 014＊ 0. 022＊ 6. 28 ±5. 40 注: 與四氧嘧啶高血糖模型對照組比較 , ＊P<0. 05, ＊＊P< 0. 01; 血糖下降百分率 ( %) = ( 實驗前空腹血 糖值 實驗後空 腹血糖值 ) /實驗前空 腹血 糖值 × 100%。 職業與健康 2009 年 5月第 25 卷第 9期 O c c u pa n dH e a l t hV o l . 25 N o . 9M a y2009 933 表 3桑 葉咀嚼片對四氧嘧啶高血糖模型小鼠糖耐量的影響 劑量組 [g /( k g ·d ) ] 0 0. 1 1. 0 3. 0 動物數 ( 隻) 10 10 10 10 x ± s 22. 82 ± 4. 01 20. 97 ± 4. 70 19. 47 ± 3. 84 18. 53 ± 3. 31 0. 307 0. 069 0. 022＊ 給葡萄糖溶液後血糖 ( m m o l /L ) 0h P 1 值 x ± s 26. 84 ± 3. 53 25. 35 ± 4. 09 22. 15 ± 3. 43 20. 11 ± 3. 37 0. 363 0. 006＊＊ 0. 000＊＊ 0. 5h P 2值 x ± s 23. 56 ±3. 56 25. 35 ±4. 09 19. 52 ±3. 34 18. 20 ±2. 89 0. 082 0. 010＊ 0. 001＊＊ 2h P 3值 血糖曲線下面積 ( m m o l /L ) 50. 22 ± 7. 02 46. 27 ± 7. 08 41. 66 ± 6. 83 38. 39 ± 6. 28 0. 203 0. 008＊ ＊ 0. 000＊ ＊ P 4值 注 : 與四氧嘧啶高血糖模型對照組比較 , ＊P<0. 05, ＊＊P< 0. 01; 血糖曲線下面積 = 0. 25 × ( 0h 血糖值 +4 ×0. 5h 血糖值 + 3 ×2 h 血糖值 ) 。 批準的葯食兩用品 , 桑葉及其製品已被用於製造桑葉茶 、桑葉汁 或添加到飲料 、果凍 、糕 點 、面 條等產 品中製 成功能 食品 。 我 們此次研究的桑葉咀 嚼片也是在此基礎上開發的便於攜帶和食 用的保健食品 , 相信隨著人們對桑葉營養保健價值的深入了解 , 桑葉將會在維護人類 健康方面發揮更大的作用 。