牡丹花丹皮抗過敏以及對色素作用

牡丹花抗過敏作用（1）抗呼吸道過敏嗜酸性粒細胞是過敏性疾病發病的關鍵環節，趨化因子Eotaxin是哮喘患者呼吸道黏膜上皮嗜酸性粒細胞的特異性趨化因子。

Kim等報導丹皮酚能顯著降低腫瘤壞死因子（TNF-a）、白介素（IL-4）以及L-1β聯合刺激下的人2型肺泡上皮細胞A549過度表達Eotaxin，抑製嗜酸性粒細胞向肺泡上皮細胞的趨化遷移。Du等認為，丹皮酚100mg/kg灌胃能顯著抑製卵清蛋白誘導的BALB/c小鼠對氯乙醯膽鹼的氣道高敏現象，減少肺泡灌洗液中炎性細胞及嗜酸性粒細胞計數，並升高灌洗液中干擾素y水準，降低IL-4、IL-13水準以及血清IgE水準，從而緩解氣道的過敏反應。上述研究結果有望為牡丹皮在抗過敏性哮喘的藥物開發提供初步的文獻支撐。

（2）抗過敏性休克Kim等發現，丹皮酚能有效抑製腹膜肥大細胞釋放組胺，同時削弱抗CD40單克隆抗體激活的B細胞合成IE，下調IL-4表達和TNF-o合成，提示丹皮酚具有抗I型過敏反應作用，可應用於過敏性休克的治療。

（3）抗皮膚過敏丹皮酚劑量依賴性抑製角叉菜聚糖誘導的大鼠的熱覺過敏反應，減少大鼠爪部皮膚滲出液中中性粒細胞浸潤和TNF-a、IL-β、IL-10及攝護腺素E2（PGE2）和環氧合酶2（COX-2）的含量。

抑製皮膚色素生成，酪氨酸酶是皮膚黑色素生物合成的關鍵酶，它不僅決定黑色素合成的速率，還是黑色素細胞分化成熟的特徵性標誌。蘑菇酪氨酸多巴速率氧化法測定結果顯示，丹皮酚對酪氨酸酶具有明顯抑製作用，說明丹皮可能具有防曬作用。丹皮酚呈劑量依賴性抑製酪氨酸酶活性及黑色素形成，並能有效抑製黑色素向角質細胞的轉運，從而減輕皮膚色素沉著。丹皮酚抑製黑色素形成與其減弱CAMP反應元素結合蛋白磷酸化有關，同時丹皮酚的上述效果受轉錄因子c-Jun氮端激酶/應激活化的蛋白激酶（JNK/SAPK）的影響。

影響丹皮品質的因素，丹皮的主要藥效成分是丹皮酚。丹皮酚為白色或微黃色有光澤的針狀結晶，氣味特殊、味微辣、易溶於乙醇和甲醇中，在熱水中溶解，不溶於冷水，可隨水蒸氣蒸餾，熔點49~51℃，且在紫外光區有強烈吸收。

丹皮酚的提取方法，隨著丹皮酚的藥用價值被發現，丹皮酚研究的日益廣泛，其化合物的提取方法也越來越多，到目前為止，牡丹皮中丹皮酚的提取方法有煎煮法、CO2超臨界流體萃取法、有機溶劑提取法及水蒸氣蒸餾法等，其中以水蒸氣蒸餾法最為普遍。下面就對丹皮酚的主要提取方法作以簡單介紹。

（1）煎煮法煎煮法提取含牡丹皮的中藥復方時，牡丹皮藥材後下煎煮5~10min，藥液直接使用。該方法優點在於工藝十分簡便，但丹皮酚轉移率低（41.1%），且由於煎煮時間短，苷類成分未能有效煎出，若延長煎煮時間則丹皮酚損失嚴重，故煎煮法不適用於牡丹皮的提取，不過在患者煎服傳統復方湯劑時仍不失為一種簡便的方法。王立等將牡丹皮藥材50g，加入到10倍量的沸水中，煎煮5min，濾過，藥渣同法再煎煮1次，濾過，合併濾液並測定體積。

藥典法測定其丹皮酚量，計算丹皮酚總量。總提取物收率7.56%，丹皮酚的提取率為1.15%及轉移率為41.1%。穆惠慈等對煎煮六味地黃湯時丹皮的煎煮時間進行研究，發現較之傳統煎煮方法（配方中藥混合以處方總量的5倍水浸泡20min後煎煮40min汁，第二次加水量為處方量的4倍煎煮30min，每次煎畢後雙層紗布過濾，兩次兩次煎煮液為500mL)，丹皮酚的含量以後下5min（按傳統發煎煮藥材，牡丹皮另放，煎煮35min後，加入牡丹皮煎煮5min過濾取汁，第二次煎煮同前）最高，隨著後下煎煮時間的延長，丹皮酚的含量隨之降低，以傳統方法丹皮酚的含量最低。這可能與丹皮酚具揮發性、易隨蒸氣逸散有關，因此，為減少有效成分損失，牡丹皮應採用後下法，以提高湯劑中丹皮酚的含量。

張建民等研究也同樣發現，在含牡丹皮湯劑的製備中，牡丹皮採取後下煎煮5~10min，其煎煮藥液中丹皮酚含量最高（檢出率達40%~50%），且牡丹皮在煎煮前先浸泡丹皮酚煎出率高於不浸泡直接煎煮，表明浸泡有利於丹皮酚成分的溶出，浸泡時間以0.5~1.0h為宜。

（2）CO,超臨界流體萃取法CO,超臨界流體萃取法是化工領域中近20年來出現的一種分離工藝。超臨界流體兼有氣體和液體的特性，且由於超臨界流體提取工藝具有低能耗、無汙染和適合處理易受熱分解的高沸點物質等優點，引起了食品和藥品等工業的廣泛興趣和應用。超臨界流體萃取法是當前中草藥有效成分提取的一個發展方向，具有提取溫度低、時間短等優點。超臨界CO2的性質與正己烷的極性相似，因此特別適於萃取脂溶性成分。超臨界萃取的過程主要由萃取階段和分離階段兩部分組成。在萃取階段，超臨界流體將所需組成從原料中萃取出來；在分離階段，通過改變某個參數，使萃取組分與超臨界流體組相分離，並使萃取劑循環使用。在壓力15MPa、溫度52℃的提取條件下，2.5h後該法提取的丹皮酚提取液呈淡紅棕色液體，冷藏後自動分層，上層為淡黃色液體，下層為淡紅棕色固體。

謝華通等採用CO2超臨界流體萃取裝置萃取，經紫外分析測定，在35℃、20MPa的條件下，丹皮酚的得率最高，提取率為0.4174%。在上述條件下，進行最優工藝的驗證，結果為：得率為0.5513%，與試驗結果相符合。其萃取丹皮中丹皮酚的最優工藝為在不添加任何夾帶劑的情況下，CO，的流量固定為20Lh，萃取溫度35℃，萃取壓力20MPa，分離溫度為35℃，分離壓力7MPa，固定萃取3h。CO,超臨界流體萃取法中有幾個因素可影響丹皮酚的收率。

萃取壓力謝華通等研究認為，在10~15MPa內，丹皮酚收率隨萃取壓力升高而增加。隨著壓力的增加，CO2超臨界流體的密度增加，使得丹皮酚溶解度增加，但達到15MPa時收率幾乎達最大值，此時繼續增加壓力，CO，超臨界流體的介電常數增加，極性增大，反而使得丹皮酚溶解度開始降低。