摘要桑葉為桑科植物桑Morus alba 具有清肺潤燥、舒散風熱、涼血明目的功效,主要用於肺熱咳嗽、風熱感冒、頭昏、頭痛、眩暈、目赤、血熱吐血。現代藥理學研究表明,桑葉具有降血糖的作 用,可用來預防和治療糖尿病。本論文在課題組前期研究的基礎上,考察了不同 產地桑葉藥材中蘆丁、總黃酮和1一脫氧野尻黴素的含量。採用柱色譜和波譜技術 分離鑒定了桑葉總黃酮有效部位中的主要化合物。研究了桑葉降血糖有效部位的 品質標準,以及對o一葡萄糖苷酶的抑製作用,為桑葉藥用資源的合理利用以及開 發具有降血糖功效的中藥新葯提供理論依據。
主要研究內容和結論如下: 1、不同產地桑葉藥材中蘆丁、總黃酮和DNJ的含量測定。分別採用高效液 相紫外檢測法、紫外分光光度計法和柱前衍生化一高效液相熒光檢測法測定了不 同產地桑葉藥材中蘆丁、總黃酮和DNJ的含量。結果表明,蘆丁、總黃酮和DNJ 的品質比分別在0.0434~3.6627、13.2270-54.7382、0.2649~2.5339mg/g之問,新 疆博樂產地的桑葉中蘆丁、總黃酮含量最高,江蘇泰州產地的桑葉中DNJ含量 最高。不同產地桑葉中蘆丁、總黃酮和DNJ的含量存在極顯著差異(P<0.01)。
2、桑葉總黃酮部位化學成分研究。採用聚醯胺柱色譜、ODS反相柱以及 HPLC等方法對桑葉總黃酮部位進行分離、純化,得到5個單體化合物。通過譜 學性質並結合文獻鑒定出它們分別為:綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、蘆丁和槲皮 。
3、桑葉降血糖有效部位對葉葡萄糖苷酶的體外抑製作用研究。採用了單因素實驗對底物溶液的用量、酶液的用量和反應時問進行了優化,建立了體外抑製 0.葡萄糖苷酶活性的反應體系,並研究了桑葉總黃酮和桑葉生物鹼不同配比對小 葡萄糖苷酶以及澱粉酶的抑製作用。結果表明,體外抑製a.葡萄糖苷酶活性的最 佳反應體系為40mg/mL的蔗糖溶液用量為0.4mL、6U/mL的酶液用量為0.2mL、 反應時間為20min。當桑葉總黃酮和桑葉生物鹼的比例達到3:2時,其抑製率 為75.2%,比阿卡波糖略高,且繼續提高桑葉生物鹼所佔比例後抑製率基本不再 增加。對澱粉酶抑製率的比較可看出,阿卡波糖對澱粉酶的抑製率明顯高於其他 組別。 桑葉降血糖有效部位的初步藥學研究 。
4、桑葉降血糖有效部位品質標準研究。採用薄層色譜法,分別建立了桑葉 總黃酮和桑葉生物鹼有效部位的薄層鑒別方法。紫外分光光度法測定了桑葉總黃 酮有效部位中總黃酮的含量,暫定總黃酮含量以蘆丁計不得低於50%。柱前衍生 化高效液相熒光法測定了桑葉生物鹼中DNJ的含量,暫定其含量不得低於50%。 對兩個有效部位的乾燥失重、熾灼殘渣和重金屬含量進行了研究,制定了相應的 含量限度。 關鍵詞:桑葉,生物鹼,黃酮,化學成分,a一葡萄糖苷酶,品質標準 。
1.1桑葉的研究進展 第一章緒論 1.1.1桑葉的介紹 桑葉又名神仙葉、鐵扇子等,為桑科植物勤4tOrUS alba 苦,性寒,歸肺、肝經。具有舒散風熱、清肺潤燥、涼血明目的功效,主要用於風熱感冒、肺熱咳嗽、血熱吐血、頭昏、頭痛、眩暈、目劑。桑葉多破碎、 皺縮。長8~15cm,寬7~13cm。完整者有柄,葉片呈寬卵形或卵形,基部截形 或心臟形,先端微尖,邊緣鋸條或鈍鋸條狀,局部不規則開裂,葉脈網狀密生白 柔毛,脈上被疏毛,脈基具簇毛。上表面淺褐色或淺綠色,局部有小疣狀凸起; 下表面顏色稍淺。質脆易碎。氣淡,味微澀。 桑葉藥用歷史悠久,以經霜者為佳,是我國的傳統中藥之一。中醫歷來認為 桑葉經霜後具有上乘品質,古代眾多醫藥典籍中採用的桑葉也多為經霜後採收 (霜桑葉),如《本草圖經》中指出:「桑……霜後,三分二分己落,一分在者, 名神仙葉,即採收」;《重訂本草徵要》載:「桑葉…經霜為上,氣質尤純」;《本 草撮要》中記載:「一之代茶,取經霜者,長服止汗」;歷版《中國藥典》中收錄 的桑葉藥材也都為「霜桑葉」。
1.1.2桑葉的化學成分 1.1-2.1多糖類 桑葉多糖類成分的結構極其複雜,由於多糖類分子量發散、微觀不均一性和 結構鍵中的缺陷,導致很難推測出具體的結構式,因此桑葉多糖的結構一般是按 照分子量的大小或者多糖中單糖的成分組成來描述的。 於小蓉掣利用氣相色譜法分析桑葉多糖中的單糖組成,結果發現,新疆葯 桑葉多糖的組成為半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、木糖和甘露糖,摩爾組 成比為15.52:12.36:9.59:7.16:1.09:1.05。 孫蓮等『51用2mol/L H2S04先將多糖水解成單糖,然後用1.苯基一3一甲基一5一吡唑 啉酮(PMP)衍生化,採用反相高效液相色譜法測定單糖。結果發現,桑葉多糖 桑葉降血糖有效部位的初步藥學研究 是由半乳糖醛酸、阿拉伯糖、葡萄醛酸、鼠李糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖等單 糖構成。 張曉採用DEAE.纖維素和凝膠柱層析從桑葉粗多糖中分離純化得到一個 均一的多糖組分SJC。通過甲基化、高效凝膠過濾色譜法和紅外光譜等分析方法 對SJC的一級結構進行鑒定。結果表明,SJC是由葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等組 成的雜多糖,分子量為2.Ox 106。SJC包括的連接方式有:14.連接的半乳糖,1,4一、 16.、14,6一連接的葡萄糖和1. 1,2,3.連接的鼠李糖。
1.1.2.2生物鹼類 生物鹼是桑葉中的主要活性成分。其中1.脫氧野尻黴素(1一deoxynojirimycin) 是一種強效的.糖苷酶抑製劑,在上世紀70年代,EhM.Yagi等【71從桑樹的根裡首 次分離出來。日本學者Asano等〔引利用Dowex50W-X8、DOWEXl.X2和Sephadex 等樹脂從桑葉中分離1,4一dideoxy-1,4-imino-(2-0-p-D—glucopyranosyl)一D-arabinitol、 N—methyl一1一deoxynojirimycin、14-dideoxy-1.4-imino-D-arabinitol、fagomine、 2-0-a—D-galactopyranosyl一1一dexxynojirimycin、1-deoxynojirimycin和 1a,2p,3a,41B-tetrahydroxy—nor-tropane七種生物鹼。 倪麗等191採用ODS、陰陽離子交換樹脂等多種柱層析方法對桑葉水溶性成分 進行分離純化,並利用NMR、MS等解析手段確定其化學結構。分離得至lJfagomine、 l-deoxynojirimycin和2-O-a-D-galactopyrano-syl-1一dexxynojirimycin。 尚磊等【101經過分離純化得到桑葉總生物鹼有效部位,採用柱前衍生化 HPLC—MS—MS法鑒定出6個生物鹼類成分,分別)91-deoxynojirimycin、fagomine、 3-epi—fagomine、DAB、calystegine B2和2一O-Glc-DAB。 王尉綜合運用了陽離子樹脂、陰離子樹脂、Sephadex LH一20凝膠,對桑葉 水提物進行了分離純化,HPLC—MS、NMR結構鑒定得到l-deoxynojirimycin和其 i個類似物,分別為:2-0一a—D-galactopyranosyl.1一dexxynojirimycin、 1,4一dideoxy-1,4-imino-D-arabinitol和fagomine。
1.1.2.3黃酮類 桑葉中總黃酮的含量大約佔桑葉乾重1.O%~3.0%,是桑葉中含量比較高的 一類化合物,同時也是桑葉中化學結構較明確、研究最多的一類化合物。現有 相關文獻報導,已有學者從桑葉中分離出槲皮素以及衍生物(槲皮素.7一氧 江蘇大學碩士學位論文一p—D一葡萄糖苷、槲皮素.3.三葡萄糖苷、槲皮素一3.氧一p—D.葡萄糖苷、槲皮素.3. 氧.a.L.阿拉伯糖苷、槲皮素一3一(6。丙二酞基)一葡萄糖苷、槲皮苦素、槲皮素.3一氧 .p.D.半乳糖苷)、山奈酚以及衍生物(山萘酚一3一氧.a.L.阿拉伯糖苷、山萘酚.3一 氧.值.L.鼠李糖苷、山奈酚一3.氧一D.D.葡萄糖苷、山奈酚.3.氧.p.D.半乳糖苷)、蘆 楊燕等採用RP.C18、SephadexLH.20、矽膠等色譜方法,從桑葉95%的乙 醇提取物中分離得到2個查耳酮類化合物、3個黃酮類化合物和4個Diels.Alder類 化合物,通過NMR、MS等波譜解析方法鑒定了化合物的結構。分別為kuwanon chalcomoracin、6-geranylapigenin、norartocarpetin、kuwanonC、isobavachalcone、 morachalcone A、mulberrofuran F和mulberrofuran Fl。 胡曉等從桑科3屬11種藥用植物中分離出來一系列結構新穎的化合物, 包括雙黃酮、苯並呋喃二聚體和新骨架化合物。發現很多黃酮類化合物對抑製胰 脂肪酶和促進脂肪細胞分化都有很好的活性,為研究糖尿病和肥胖症提供的很重 要的價值。
1.1.2.4揮發性成分 桑葉中還有很多揮發性的成分,梁貴秋等【19I利用GC-MS對桑葉茶中的揮發 性成分進行分析分類,並通過NIST 05譜庫比對。結果發現,從桑葉茶中檢測出 了42種揮發性成分,主要包括烴類10種、醛類10種、酮類9種、雜環類化合 物4種、醇類4種、酯類3種和酸類3種,其中酮類和醛類含量比較高,分別佔 總揮發性成分含量的22.36%和24.67%。 李衛國等『201為了研究桑樹的病蟲害防治、生理生態以及家蠶食桑的生理機制, 利用靜態頂空.氣相色譜.質譜聯用技術檢測了不同種桑葉的揮發性成分。結果鑒 定出了30多種揮發性成分,主要為酯、酮(醇)和烴(烯烴和烷烴)類化合物。
1.1.2.5氨基酸類【2I】 桑葉中有人體所需的15種氨基酸,分別是天冬氨酸(Asp)、苯丙氨酸(Phe)、 纈氨酸(Val)、賴氨酸(Lys)、異亮氨酸(Lle)、亮氨酸(Leu)、蘇氨酸(Thr)、 甲硫氨酸(Met)、精氨酸(趣)、組氨酸(His)、酪氨酸(Tyr)、絲氨酸(Ser)、 谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)。其中含有新生兒所必需的組氨酸 (His)和成年人所必需的7種氨基酸。
1.1.2.6植物甾醇類 桑葉中含有菜油甾醇、內消旋肌醇、谷甾醇、羽扇豆醇等甾醇類化合物。韓 軍花等『221研究發現,每1009桑葉中含有谷甾醇77.8mg、菜油甾醇8.3mg、豆甾 醇6.0mg、二氫谷甾醇78.0mg。
1.1.2.7其他類成分 桑葉中還含有一些鈣、鉀、鐵等礦物質,銅、鋅、錳、鎂等微量元素,視黃 醇、胡蘿b素、VA、VBl、VB2、VC、煙酸等維生素。除此之外,還含有大量 的食物纖維,約佔乾重的52.9%。
1.1.2.8降血糖 Naowaboot等口41研究了桑葉乙醇提取物對STZ引起的小鼠慢性糖尿病作用。 結果表明,灌胃桑葉乙醇提取物的小鼠血糖下降了22%,與灌胃4U/kg的胰島素 藥效相當;丙二醛、脂質氫過氧化物和血紅蛋白Alc濃度分別為3.50+0.331aM、 3.760.18I_tM和6.784-0.30%,與慢性糖尿病小鼠相比明顯下降。 Kim等251發現桑葉提取物作為一個強效的a一糖苷酶抑製劑,能夠有效的抑 製餐後血糖的升高。通過對SD小鼠的體重、盲腸的體積、糞便的顏色、盲腸中 澱粉含量和腸道運輸能力的研究得出結論,桑葉提取物能夠明顯抑製蔗糖酶、麥 芽糖酶等二糖酶的活性,對澱粉酶的抑製作用比較弱,沒有腹脹氣、腹瀉等副作 用,是阿卡波糖等旺一糖苷酶抑製劑的一個良好替代品。 楊雨等261研究了桑葉多糖、生物鹼和黃酮對小鼠降血糖的作用。結果發現, 桑葉生物鹼和多糖均能夠使四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的血糖值顯著降低,促進肝 糖的合成,增加肝甘糖,而桑葉黃酮沒有顯著的降血糖作用。 玄光善等2刀通過動物實驗研究了桑葉中生物鹼、多糖和黃酮對STZ致糖尿 病模型小鼠的血脂、血糖以及糖耐量的影響。結果表明,三種組分均能明顯降低 模型小鼠的血脂異常、血糖值,增加糖耐量,血糖的下降率分別為37.55%、14.42% 以及27.33%,其中桑葉生物鹼降低血糖作用最明顯,其效果優於鹽酸二甲雙胍。 陳建國等『281研究發現桑葉多糖能夠顯著的緩解糖尿病小鼠的病症,促進肝糖 原的合成,肝己糖激酶、血清胰島素的分泌,提高肝超氧化物歧化酶的活性,降 低肝丙二醛水準,桑葉多糖中劑量還能夠促進肝丙酮酸激酶的分泌,而對肝谷胱 江蘇大學碩士學位論文甘肽過氧化物酶活性影響不顯著。
1.1.2.9降血脂 仝義超等291研究發現,桑葉粗提物具有降低血清總膽固醇和甘油三酯的能力, 正丁醇和水部位輔助降血脂效果顯著。對桑葉功能性成分進行降血脂實驗發現, 桑葉中的甾醇類、總黃酮、總多糖、總生物鹼的高密度脂蛋白膽固醇分別上升了 60.27%、49.70%、10.57%、27.53%;甘油三酯分別下降了69.22%、28.87%、24.52%、 35.30%,都顯著高於對照組。 Kojima掣301研究了桑葉提取物對人體內血脂的影響。發現高血脂病人在飯 後服用桑葉提取物6周後,血清中甘油三酯的含量由原來的200mg/dl降低到 157mg/dl,服用12周後降低到97mg/dl,低密度脂蛋白膽固醇顯著降低,血液和 生化參數沒有明顯的變化。結果表明,富含DNJ的桑葉提取物可以有效的降低 血液中膽固醇。 謝惠萍等311研究了桑葉提取物對動物降血脂的作用。將大鼠餵食基礎飼料5 天后,禁食16h,取尾血測定總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(皿L—C) 和甘油三酯(TG),然後根據TC水準分成四組,每組10隻,劑量組在給予高脂 飼料的同時給予不同劑量的桑葉提取物,模型組給予高脂飼料和蒸餾水,連續給 予一個月後,禁食16h,取血清測定TC、HDL—C和TG。實驗結果表明,各個 劑量組與模型組相比,HDL—C顯著升高,TG和TC則明顯降低。
1.1.3.1降血壓 桑葉中含有豐富的蘆丁、槲皮素和Y一氨基丁酸(GABA)等物質。蘆丁可以 降低毛細血管的通透性,防止高血壓引起的視網膜出血等併發症。現如今蘆丁已 被開發出許多復方製劑,如珍菊降壓片、心爾泰等【321。槲皮素通過抑製鈣通道、 降低細胞內遊離鈣水準來舒血管降壓〔331。GABA是一種非常重要的抑製性神經 遞質,能作用於脊椎的血管運動中樞,主要是通過促進血管擴張和調節腦內 GABA受體系統來降低血壓。
1.1.3.2抗氧化、抗衰老 桑葉中的多酚、黃酮和花青素具有較好的抗氧化、抗衰老作用,能夠極大的 提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性,並且降低體內的有害物質,消除或減少聚 積在體內的脂褐質1351。 桑葉降血糖有效部位的初步藥學研究 邢東旭等還發現桑葉多糖對羥基自由基(.OH)和1,l一二苯基一2一三硝基苯 肼自由基(DPPH)具有很強的清除作用。此外,還能夠降低小鼠肝臟丙二醛(MDA) 的積累和形成,並有顯著的劑量效應。
1.1.3.3抗菌、抗炎 梁薇等『371研究了桑葉水提物和乙醇提取物的抗菌作用。結果表明,兩者對金 黃色葡萄球菌、變形桿菌、綠膿桿菌、大腸桿菌均有顯著的抑菌作用,且醇提物 中乙醇的濃度越高,抑菌作用越好。但是95%Z醇提取物對大腸桿菌和綠膿桿菌 沒有顯著的抑製作用。 肖艷芬等發現桑椹、桑葉的水煎液對金黃色葡萄球菌耐葯株、金黃色葡萄 球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、乙型溶血性鏈球菌、甲型溶血性鏈球菌均有較好的 抑菌作用,桑葉的抑菌作用明顯強於桑椹,特別是對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌 耐葯株、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌有很強的殺菌作用,而對乙型溶血性鏈球菌 和甲型溶血性鏈球菌無抑菌作用。 Park等391研究發現桑葉提取物能夠有效的降低炎性介質和細胞因子的表達, 其抗炎作用主要是通過抑製IrBa磷酸化,從而使NF.rB的活性降低,而對MAPK 的磷酸化卻沒有明顯作用。
1.1.3.4抗病毒 王輝等利用細胞病變減少法發現不同品種桑葉中含有抗病毒的活性物質, 並且具有一定的選擇性。其中,能夠有效抑製單純皰疹病毒1型的品種最多,廣 東桑葉的水部位和石油醚部位具有較強的抗甲型流感病毒的活性,還有一部分能 夠抑製登革病毒2型的活性,20個桑葉品種對柯薩奇B3病毒無抑製作用。
1.1.3.5桑葉在保健品中的開發應用 我國具有豐富的桑葉資源,市場潛力大,開發前景廣闊。一直以來,桑葉主 要被用來養蠶,幾乎沒有對桑葉進行其他方面的開發研究。近幾年來,隨著人們 物質文化生活的豐富和人口老齡化的加劇,對功能性食品的需求也相應加大。國 家衛生部已將桑葉列為葯食兩用的中藥材之一,其安全性高,價格優廉,是作為 功能性食品開發的一個重要原料。日本是最早將桑葉作為原料進行開發的國家, 並且已有「桑葉茶」、「桑葉壽司」、「桑葉口服液」等多種營養保健品,年產值高 江蘇火學碩+學位論文達幾十億日元。目前,我國也對桑葉進行了一系列的研究,王芳等14lJ將桑葉洗凈 後陰乾粉碎,加入NaCl水溶液超聲浸提,再進行工藝處理後得桑葉蛋白粉。何 晉浙等42悃水提取桑葉中有效成分,濃縮乾燥後添加到茶葉中研製成的桑葉茶具 有較好的抑製洳葡萄糖苷酶的效果。張剁43以綠茶和桑葉為原料,提取桑葉中 的酚酸類物質,優化工藝,開發的桑葉綠茶複合飲料具有特殊的香氣,酸甜適口。 李靜等44J用桑葉、大米為原料釀造桑葉米酒,製得的米酒澄清透明、綿甜爽口、 伴有桑葉的清香,是一種具有保健功能的新型米酒。
1.1.3.6桑葉在醫藥中的開發應用 中國古代的很多醫書上記載了桑葉的藥用價值。《神農本草經》:「氣味苦甘 寒,有小毒,主寒熱出汗。」《本草綱目》:「治勞熱咳嗽,明日長髮,止消渴,乃 配本草》:「甘,寒。入手足陽明經。清西方之燥,瀉東方之實。去風熱,利關節,疏肝,止汗。」《本草拾遺》:「主霍亂腹痛,吐下。研取白汁,合金瘡。」隨著現 代醫學的發展,桑葉在臨床上的應用也越來越廣泛,霜桑葉與炙芭葉、炒杏仁、 川貝、黃芪、瓜萎和桃仁組成的復方製劑對胸痛、咳嗽、咳痰等塵肺病具有很好 的療效,且副作用小。大量研究表明,桑葉中的DNJ等多羥基生物鹼具 有顯著的降血糖作用,且毒副作用小,可以將其開發為治療II型糖尿病的新葯。
1.2糖尿病的概況 糖尿病是一種以高血糖為特徵的內分泌代謝紊亂疾病,其發病的機理主要是 由於胰島p細胞分泌胰島素不足或生物學作用受損,或兩者共同引起的。世界衛 生組織(wHO)將糖尿病分成I型糖尿病、型糖尿病、妊娠期糖尿病和其他 類型糖尿病,其中1I型糖尿病佔95%。I型糖尿病也稱為胰島素依賴性糖尿病, 是由於胰島素分泌不足導致高血糖,是一種家族遺傳的疾病,多發生於青少年或 兒童時期;II型糖尿病也稱為非胰島素依賴性糖尿病,主要是由於機體對胰島素 不敏感,多發生於30歲以後的中老年人;妊娠期糖尿病是圍產期的併發症之一, 是源於妊娠期婦女分泌的荷爾蒙導致的細胞胰島素抵抗。還有一些其他類型的糖 尿病,比如遺傳性的胰島素抵抗、胰臟疾病、荷爾蒙失調、胰島B細胞基因缺陷 等等。目前,全世界有大約3.4億糖尿病患者,2004年大約有340萬人死於糖尿 桑葉降血糖有效部位的初步藥學研究病,超過80%的死亡病例發生在低收入或中等收入國家。 糖尿病的典型癥狀是「三多一少」,即多尿、多飲、多食和體重下降,還有 一些不典型的癥狀,如頭昏、乏力。然而糖尿病的可怕之處是它還會帶來一系列 嚴重的併發症,主要表現在心臟血管、四肢周邊血管、腦血管以及腎臟等全身微 循環的障礙。同時還會引起慢性的併發症,比如糖尿病視網膜病變、糖尿病神經 病變和糖尿病足等。 目前,針對糖尿病不僅應只在藥物治療上面,還需要對病人進行一些糖尿病 的教育,包括糖尿病尿糖、自我血糖的檢測,降糖藥物的用法及不良反應等。在 日常生活中更應該注意飲食,多吃五穀粗糧、豆製品,不宜吃含糖、膽固醇高的 食物,同時還可以進行適量的有氧運動。
1.3中藥活性成分治療糖尿病的概況 經過幾千年的發展,傳統醫學在治療糖尿病上形成了自己獨特的理論體系, 積累了豐富的臨床經驗。雖然西藥的藥效作用強,但由於其作用靶點單一,有明 顯的副作用,並且不利於糖尿病患者的長期服用。而中藥具有豐富的資源、毒副 作用小、易於長期服用等特點,隨著現代醫學的發展,有關中藥降血糖的研究不 斷深入,越來越多的中藥活性成分被發現具有較強的降血糖作用。
1.3.1生物鹼類 小檗鹼是黃連、黃芩、黃柏、三棵針中的主要有效成分,已有研究發現, 小檗鹼能夠調節脂質代謝降低血糖。閆忠卿掣541用不同濃度的小檗鹼和二甲雙胍 乾預小鼠的原代肝細胞,並運用RT-PCR和Western.blot檢測了HNF4amRNA和 蛋白的表達,同時檢測葡萄糖激酶的活性。結果表明,二甲雙胍與陰性對照組無 明顯差異,小檗鹼能夠顯著促進HNF4amRNA和蛋白的表達,葡萄糖激酶的活 性明顯增強,進而治療糖尿病。付燕掣551還發現黃連中藥根鹼與小檗鹼都能夠很 好的降低血糖,兩者以天然比例配伍後未見協同或拮抗作用,推測黃連中可能還 存在其他重要的成分。
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