九州專家專欄│DC細胞治療慢性乙型肝炎前景

劉向善，主任醫師、教授，畢業於第四軍醫大學，曾在西京醫院血液科、專家門診部、唐都醫院專家門診肝病中心工作，長期從事臨床免疫、細胞療法治療肝病、乾細胞抗衰老、乾細胞治療其它難治性疾病的臨床研究，積累了豐富的臨床經驗，取得多項研究成果。曾任陝西省風濕與免疫學會常委、秘書長，2007年起任解放軍第三0三醫院生物技術診療中心主任，現為九州生物科技醫學中心細胞治療專家。

DC細胞治療慢性乙型肝炎前景

樹突狀細胞（Dendritic Cells , DC）是體內重要的一類抗原呈遞細胞（Antigen－presenting Cells , APC），其共同的生物學特性是細胞表面有許多樹枝狀突起，胞內具有豐富的線粒體，與巨噬細胞、B細胞抗原呈遞功能不同， 只有DC能夠刺激初始型T細胞（Na?ve T cells）並將相關的抗原信息傳遞給它，使之分化、激活成為抗原特異性細胞毒T 淋巴細胞（CTL），後者影響機體的細胞和體液免疫系統，因此，DC被認為是機體免疫反應的始動者。

乙型病毒性肝炎是我國最重要的傳染病之一。國內已有臨床醫生在積極研究評價DC生物學特徵及DC在乙型肝炎病人的功能、數量、臨床意義及其與其它免疫細胞關係。已有學者已經開始應用經體外培養並以HBV抗原肽衝擊過的DC乾預乙型肝炎。

B肝病毒的清除依賴於強大的、多克隆的、特異的CD8＋細胞毒性T細胞和CD4＋T輔助細胞來對抗病毒表面抗原、核心抗原和P蛋白抗原。而且，效應T細胞通過分泌淋巴因子能夠中止病毒複製而不損傷感染的肝臟細胞，這些效應T細胞需要APC提呈的抗原、MHC分子、共刺激分子共同激活CD40 、CD80 、CD86，只有DC能直接使初始型T細胞活化，促進Th1和Th2細胞分化，增強CTL細胞功能。有研究認為長期慢性的B肝感染與不足的CTL 有關。這只是表象，而這些情況均與DC功能障礙有關。唯一的辦法就是在體外培養DC 並用HBV 的抗原肽衝擊，使其恢復傳遞B肝病毒抗原信息的功能。

Yukihiro Shimizu等人對B肝病毒轉基因小鼠研究DC細胞治療前景：這種小鼠對B肝病毒有免疫耐受，將其DC體外培養用HBsAg刺激後回輸小鼠的尾靜脈中，發現：

1、這種小鼠在體外培養的DC可產生正常對抗B肝病毒的能力，並且這種激活的DC在小鼠體內可以激活抗原特異性的CTL細胞，說明這種小鼠CTL前體細胞是正常的。

2、只需要100個被細胞因子激活的DC輸入這種小鼠體內就可以打破小鼠對B肝病毒的免疫耐受，且這些DC表達正常水準的粘附分子、受體和活動標誌，表現出正常的抗原提呈和呈遞作用。

3、這種小鼠DC無論在形態上還是功能上均正常，且在激活後可以呈遞MHCⅠ類分子與B肝病毒抗原的複合體。CTL細胞需要信號才能夠被激活，試驗中這種信號來自體外激活的DC細胞。

有人最近將攜帶HBV c基因的病毒與小鼠DC一起培養後，用PCR發現DC內有c基因活動，並用western blot方法發現DC表達HBV c基因，這種轉基因DC正常表達CD80分子和MHCⅡ類分子，在體內可引起B肝核心抗原特異的CTL和TH1細胞反應。

國內學者李用國等人對19名慢性B肝患者進行研究，作者抽取患者自身血液60毫升，提取PBMC培養DC成熟，再應用HBsAg刺激後回輸患者皮下，每兩周1次，共治療兩次，研究檢測了患者的肝臟功能、B肝病毒抗原抗體系統、HBV－DNA，發現在11名患者出現不同程度的病毒應答，7例出現生化應答。北醫人民醫院李若冰等人應用類似的方法體外培養DC 治療慢性B肝取得良好的效果。

以上的實驗結論說明，通過DC 細胞的體外培養，完全可以克服B肝病人DC 細胞的功能障礙，打破B肝病人的免疫耐受，最終清除肝內外的所有病毒。B肝病毒的治療可能因為DC功能和作用的進一步認識而得到快速發展，總之，對乙型肝炎的體細胞免疫治療將會成為重要的臨床治療方法，DC在治療策略中將起到至關重要的作用。