蛋白桑：家蠶和桑葉中1-脫氧野尻黴素含量變化的研究

１．脫氧野尻霉索（ＤＮＪ）及其衍生物是一種高效的ａ一葡萄糖苷酶抑製劑，可用於治療糖尿病、肥胖症、病毒感染等疾病。目前已發現多種植 物和微生物具有合成和積累ＤＮＪ的特性，其中以桑葉中的含量最高。家 蠶一生食桑，且對ＤＮＪ具有富集作用，其體內的ＤＮＪ含量又遠高於桑葉。 因此ＤＮＪ是桑和蠶體中的重要生理活性物質，尤其是與其降血糖作用密 切相關。但是，由於受測試方法的限制，目前對於桑葉和蠶體中ＤＮＪ含 量的變化或富集規律尚缺乏系統研究。有鑒於此，本文首次建立了反相高 效液相色譜．紫外檢測法（ＲＰ．ＨＰＬＣ—ＵＶ）測定ＤＮＪ的新方法，進一步利 用該方法系統研究了桑葉中ＤＮＪ含量的變化規律，以及蠶體對ＤＮＪ的富 集作用，並探討了脫脂全蠶粉的降血糖效果。旨在為篩選富含ＤＮＪ的蠶 桑資源或其他生物資源、制定衡量全蠶粉和桑葉製品降血糖效果的品質指 標等提供參考。主要研究結果如下： １以Ｏ．０５ｍｏｌ／ＬＨＣＩ為溶劑提取蠶粉和桑葉粉中的ＤＮＪ，以９．芴基氯 甲酸甲酯（ＦＭＯＣ）作為衍化劑，在ｐＨ８．５硼酸鹽緩衝液中進行衍生化反 應，生成具有紫外吸收的ＤＮＪ．ＦＭＯＣ絡合物，用反相高效液相色譜．紫外 檢測法分離測定ＤＮＪ．ＦＭＯＣ。結果表明，反應產物的色譜圖分離效果良 好，ＤＮＪ．ＦＭＯＣ的峰面積與ＤＮＪ濃度呈高度正相關關係，加樣回收率平 均為１００．７％，精密度試驗、穩定性試驗、重現性試驗、回收率試驗表明， 該方法是穩定可靠的，可以作為測定家蠶、桑葉及有關藥物中ＤＮＪ含量 的有效方法。 ２利用ＲＰ．ＨＰＬｃ．Ｕｖ法測定了不同全蠶粉樣品中的ＤＮＪ含量，發 現ＤＮＪ的含量受蠶品種、飼料、飼養季節、蠶粉的加工處理方法等多種 因素的影響。在供試的９個蠶品種中，菁松品種的ＤＮＪ含量最高；養蠶 用葉在供試的６個桑品種中，以農桑１４最佳；季節和葉位以春季適熟葉 較好：桑葉中的ＤＮＪ含量與蠶體的含量呈明顯的正相關關係。蠶粉的加 工以飢餓、冷凍乾燥或１００。Ｃ烘乾的樣品ＤＮＪ含量較高，微波乾燥最差， 但乾燥蠶粉用微波滅菌處理對ＤＮＪ含量影響不大。 ３研究了桑葉中ＤＮＪ含量與季節、品種、葉位等因素的關係。結果表明，春季桑葉中品種間ＤＮＪ含量變化不大，夏秋兩季桑葉的ＤＮＪ含量 隨桑品種和葉位變化顯著，普遍存在上位葉＞中位葉＞下位葉的規律。春 季桑葉農桑１４號品種的含量最高；夏季以７９４６號上位葉含量最高；秋季 則以湖桑３２的上位葉含量最高。枝條上部的嫩葉ＤＮＪ含量在不同季節、 不同品種間變化較小，但湖桑３２秋季葉的ＤＮＪ含量稍高於其他葉；適熟 葉中ＤＮＪ含量受品種和季節的影響較大，５個桑品均是春季葉含量高於夏 季葉，其中陝３０５的春季葉和湖桑３２的秋季葉ＤＮＪ含量較高。 ４探討了蠶體對ＤＮＪ的富集規律。蟻蠶體內檢測不到ＤＮＪ，從ｌ齡 盛食期至５齡起蠶ＤＮＪ含量相對穩定，５齡期含量逐漸減少，蛹體的含量 顯著低於幼蟲，成蟲體內含量幾乎為０，在各發育階段中以２齡眠蠶的 ＤＮＪ含量最高。在蠶體不同組織、器官中ＤＮＪ的含量存在很大差異，消 化管和血液中的含量明顯高於其他組織器官，絲腺中幾乎檢測不出ＤＮＪ。 另外還測定表明，人工飼料飼養的蠶體內不含ＤＮＪ，雄蠶體內ＤＮＪ含量 稍高於雌蠶。 ５探討了全蠶粉脫脂處理對其ＤＮＪ含量以及降血糖效果的影響。結 果表明，脫脂蠶粉的ＤＮＪ含量高於未脫脂蠶粉，且高溫乾燥處理的蠶粉 ＤＮＪ含量高於未處理的蠶粉，說明脫脂及高溫乾燥不會造成ＤＮＪ的丟失 或破壞。利用取食高糖飼料的小鼠和糖尿病模型小鼠試驗表明，全蠶粉、 脫脂全蠶粉及其複合物均有不同程度的降血糖作用，但脫脂全蠶粉比未脫 脂全蠶粉的降血糖效果有下降趨勢。 關鍵詞：１－脫氧野尻黴素；家蠶：桑葉；含量測定：富集規律；降血糖作、食後血糖空腹血糖 對照ｌ桑產品藥理作用的研究進展 １．１．１桑葉的化學成分及藥理作用的研究進展 桑葉異名鐵扇子，為桑科桑屬ＭｏｒｕｓａｌｂａＬ．的樹葉，約佔桑樹地上部 分的６４％，是桑樹的主要產物。本屬植物全球約有１６種，分布於北溫帶、 亞洲熱帶和非洲熱帶及美洲地區。我國是蠶桑業的發源地，桑樹栽培歷史 悠久，資源豐富。在我國約有１１個品種，分布於全國大部分地區，以江 蘇、浙江等南方養蠶地區產量較大。 桑葉中含有均衡的蛋白質、脂肪、碳水化合物等物質，尤其蛋白質較 為豐富。桑葉所含氨基酸數多達有２０種，種類齊全，而且必需氨基酸含 量較高，是一種優良的蛋白質資源。桑葉的維生素和礦物質含量十分豐富， 其中Ｋ、Ｃａ含量較高，桑葉中還含有少量的Ｃａ、Ｍｇ、 Ｍｎ等礦物質。桑葉中富含多種維生 素，其含量不遜於鮮茶，含量最多的是維生素Ａ，其次是維生素Ｃ。而且， 其維生素含量不受收穫季節的影響。桑葉中的食物纖維也比較多，同時含 有一定量的植物甾醇。桑葉中還含有超氧化物歧化酶、脂肪酸、香豆素、 有機酸（包括延胡索酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸等）、原創木酚、水楊 酸甲脂、傘形花內酚、胡蘆巴鹼以及靴質、香精揮髮油等特殊的功能成分 。 桑葉中含有多種黃酮及黃酮苷類化合物（江蘇新醫學院、中藥大辭典， １９７９）。桑葉中還富含多種糖類，如蔗糖、果糖、葡萄糖等。另外，桑葉 中還含有一種具有特殊功能的生物鹼一１．脫氧野尻黴素（ＤＮＪ），佔乾品 的０．１％。 桑葉作為中草藥的歷史也源遠流長，在《本草圖經》中桑葉被稱為「神 仙草」，我國的許多國醫名著如《本草綱目》、《本草經疏》、《百草鏡》、《食 療革本》等都有桑葉入葯的記載，其味甘、性平、寒，具有滋陰補血，疏 風散熱，涼血明目，益肝通氣，降壓利尿之效。現代醫學研究也證實了桑 施新琴：家蠶和桑葉中１一脫氧野尻黴素含量變化的研究 葉的保健和藥用價值。桑葉在對循環系統和消化系統方面疾病以及防癌、 抗衰老和提高免疫力等方面具有顯著的療效。 在循環系統方面，桑葉原物、水提物和醇提物等均有降血糖和治療糖尿病的作用。同時指出， 此作用是由於桑葉內含有ＤＮＪ、桑葉多糖、黃酮類物質等，ＤＮＪ對小腸 內一葡糖苷酶具有抑製作用；桑多糖可能是通過促進胰島Ｂ細胞分泌胰 島素而發揮作用；黃酮類可能是通過抑製雙糖酶，減緩小腸對葡萄糖的吸 收。報導了桑葉具有降血脂的功效，指出黃芪甙、異槲皮甙、及苯甲醇的糖甙 為發揮藥效的主要成分。研究發現，桑葉有降血壓的葯 理作用，可能是桑葉中的氨基丁酸發揮作用。 在消化系統方面，桑葉中含有ＤＮＪ、礦物質、 食物纖維、粗脂肪和未被吸收而進入大腸的糖類，使得桑葉具有了調整腸 道的作用，可緩解腸鳴、排氣、腹脹感等腹部癥狀。同時具有軟便、利尿 和降低體內脂肪的作用，以有利於排出體內過多水分和緩解浮腫。此外， 桑葉中大量的食物纖維有助於清除體內有害物質，如重金屬等。 在防癌、抗衰老和提高免疫力方面。報導，桑葉可促 進醛固酮的分泌，刺激血漿腎素的活性，使得醛固酮的分泌增加，從而改 善內分泌系統的功能以延緩內分泌系統機能的衰老。桑葉可保護神經細胞，防止神經細胞的損傷和破壞，同時提高體內超 氧化物歧化酶的活性，阻止超氧化物的形成，從而對神經系統機能的衰老 起延緩作用。研究發現桑葉可提高清除自由基酶的活性，降低組織中的脂 褐素，同時具有清除自由基延緩衰老的作用。研究發現 桑葉具有抑癌作用，可能是維生素、ＳＯＤ和黃酮類化合物的綜合作用結 果。此外，桑葉還具有抗炎、抗動脈硬化和抗絲蟲等功效。 綜上所述，桑葉對生物體具有多種藥理作用，可以維持和增進生物體 的健康。所以桑葉被開發成多種保健品上市，受人親睞，如桑葉茶、桑葉 汁飲料，功能保健性食品、超細粉末的食品添加劑、桑葉保健酒及桑葉酸 。１．１．２桑白皮的化學成分及藥理作用的研究進展桑白皮《本經》中又名桑根白皮，《孟說》中稱為桑根皮、桑皮，為 桑科植物Ｍｏｒｕｓａｌｂａ．Ｌ的乾燥根皮，秋末落葉時至次春發芽前採挖根部， 颳去黃棕色粗皮，縱向剖開，剝取根皮，曬乾入葯。桑白皮性寒味甘，歸 肺經，具有肺平喘，利水、消腫之功效，用於肺熱咳喘、水腫脹滿、尿少、 面目肌膚浮腫等症。 桑白皮主要含傘形花內酯、東莨菪素和黃酮成分桑根白皮素 （Ｍｏｍｓｉｎ）、桑素（Ｍｕｌｂｃｒｒｉｎ）、桑色烯（Ｍｕｌｂｃｒｏｈｒｏｍｅｎｅ）、環桑素 （Ｃｙｃｌｏｍｒｄｂｅｒｒｉｎ）、環桑色烯（Ｃｙｃｌｏｍｕｌｂｅｒｒｏｃｈｒｏｒｎｅｎｅ）等，又含有作用 類似乙醯膽鹼的降壓成分，並含有鞣質。近年來，國內外學者對桑白皮的 多種藥理活性和藥效進行了深入研究和科學評價，認為桑白皮有降血糖活 性、降壓、利尿、抗炎、平喘、鎮痛、抗菌、抗病毒等作用。 繼７０年代從桑白皮分離出ｍｏｒａｎｏｌｉｎｅ，並證實它有降血糖作用之後， 又有人從桑白皮分離出降血糖物質ｍｏｒａｎＡ，試驗證實ｍｏｒａｎＡ對四氧嘧 啶所致小鼠糖尿病具有明顯的降血糖作用，對葡萄糖性高血糖有一定降糖 作用。桑葉的抗病毒、防癌等功效，主要是由於桑葉中含有ＤＮＪ。桑葉的 抗腫瘤作用則是其體內的黃酮成分決定的。２０世紀７０年代開始，日本野 村太郎等人研究證實了中藥桑白皮及其他桑屬類植物根皮具有較為顯著 的降血壓作用並確認桑酮、桑呋喃、桑根酮等為活性成份。 日本佐藤昭彥等曾研究表明，桑自皮水提物或正丁醇提取物均有利尿 作用，尿量及鈉、鉀離子和氯化物排出量均增加，且水提物有明顯的導瀉 作用。國內眾多學者分別獨立研究發現桑白皮提取物具有鎮咳、平喘作用， 並以平喘、利尿作用為藥效學指標，證明東莨菪內酯為有效成分。桑葉內含有殼聚糖，因此在治療癌症和心腦血管疾病中，作用顯著且 無毒副作用；同時有預防與治療消化道疾病、清除體內過多的自由基、延 緩衰老、抗愛滋病的活性等作用。 綜上所述，桑白皮含有多種藥理活性物質，已經被開發成多種產品上 市，如降壓劑、護髮素和桑根酒等。 施新琴：家蠶和桑葉中１一脫氧野尻黴素古量變化的研究 １．２家蠶及其副產物的化學成分及藥理作用的研究進展 １．２．１家蠶幼蟲的化學成分及藥理作用的研究進展 家蠶幼蟲是以桑葉為主要天然飼料，它們從桑葉中攝取維持身體機能 和成長所必需的各種營養物質，主要包括蛋白質、糖類、脂質、維生素、 無機鹽和水分等。蠶體干物主要是粗蛋白。比較蠶體和桑葉的主要成分， 發現蠶體中粗蛋白、粗脂肪、灰分、Ｚｎ明顯高於桑葉，而粗纖維、纖維 素、半纖維素、木質素、中性洗滌纖維（ＮＤＦ）、酸性洗滌纖維（ＡＤＦ） 等明顯低於桑葉。糖類在桑葉中的主要存在形式是果 糖和纖維素，其含量約佔桑葉干物質的３５％．４０％，而在家蠶體中則主要 以海藻糖的形式存在，其含量約佔血糖總量的９０％以上。 蠶粉中含有１９種遊離氨基酸（約佔２１．５％），生物活性多肽含量豐富 （＞６ｍｇ／ｇ），還含有ＳＯＤ、凝集素、保幼素多種維生素和海藻糖等，這些 成分是機體構成和維持正常生理功能所必需的。生物活性多肽是與生長、 發育、免疫、造血等重要生命活動都密切相關的重要物質， 海藻糖具有保護生物細胞和生物活性物質在脫水、高溫、冷凍、高滲透壓 及有毒物質等不良環境條件下活性免遭破壞的功能。凝 集素具有抗病毒作用，ＳＯＤ具有抗衰老作用。另外，蠶粉中還含有一種 具有特殊功能的生物鹼一１．脫氧野尻黴素（ＤＮＪ），佔乾品的Ｏ．４％。 家蠶幼蟲體的藥用價值很早就被人們所認識。在《齊民要術》、《天工 開物》、《神農本草》、《本草綱ｌｆｌ》等古代醫書中都有家蠶幼蟲體入葯的記 載。其功效為主治ｄＪＩ疳熱、消瘦、消渴（即糖尿病）等疾病。現代醫藥 學進一步證明了家蠶幼蟲體的藥用價值，並在其藥理學基礎方面進行了深 入研究。研究發現家蠶幼蟲體在調節人體新陳代謝、降低血脂、護肝等方 面均有顯著的作用。 在循環系統方面，自１９９２年起，韓國蠶絲昆蟲研究所，對蠶的生理 功能及實用效果進行了深入研究，證明了５齡第３天家蠶幼蟲經冷凍乾燥 製成的全蠶粉末具有治療糖尿病的功效。因為蠶粉對於人體內的葡萄糖苷 酶的活性作用具有較強的抑製作用，有效阻礙二糖水解為人體易於吸收的 單糖，從而降低血糖值，適合糖尿病患者長期服用此外，蠶粉還能降低血 山東農業大學碩士學位論文 脂與膽固醇，對心血管疾病具有一定的治療作用。家蠶幼蟲體具有良好降血糖作用的藥理 學基礎是富含多種降血糖的活性物質，目前已查明主要有ＤＮ３、黃酮類化 合物、蛋白質多肽ＰＴＴＨ、甾族激素ＭＨ、Ｔ３等。蠶粉中含有高比例的不 飽和脂肪酸，其中包括人體必需脂肪酸一洳亞麻酸、亞油酸，還含有較高 的維生素Ａ。亞麻酸具有明顯的降血壓、降血脂、降膽固醇的作用，同時 也具有較好的抗炎作用。而家蠶幼蟲體內富含的高比 例不飽和脂肪酸是其調節血脂的主要活性物質之一。 在抗癌、抑製腫瘤和提高免疫力方面，蠶粉中主要含蛋白質、多種氨 基酸、脂肪酸和多糖，還有少量抗菌肽、干擾素和微量元素硒等，其中氨 基酸、多糖、抗菌肽和硒等經證實具有抗癌作用。蠶粉中含的干擾素是已知的一種具抗癌作用的化學物質， 因此具備較強的抑製腫瘤作用，尤其是對肺癌效果明顯。 蠶寶素是在家蠶中提取得到的一種可透析物，其中主要含蛋白質、１8種 氨基酸和１０餘種微量元素。進行的抗腫瘤實驗，證明 其對腫瘤抑製率很高。而如此豐富的營養組成，同樣適用於蛋白代謝障礙、 白蛋白低下的患者，在提高機體免疫力、強身健體等方面有其獨特的優勢， 同時間接地起到護肝作用。報導，蠶粉還有抗疲勞的功 １．２．２蠶蛹、蠶蛾的化學成分及藥理作用的研究進展蠶蛹含有十分豐富的營養物質。在乾蛹中，含有６０％左右的蛋白質， ２５％．３０％的油脂，其蛋白質中含有人體必需的１８種氨基酸，還含有能延 緩人體衰老的維生素Ｅ。蠶蛹自古以來就可葯、食兩用，其藥用價值在《太 平禦覽》、《日華子本草》及《本草綱目》等古籍均有記載．具有和脾胃、 去風濕、長陽氣之功效。《本草綱目》記載蠶蛹主治：「炒食治風及勞損； 研傅瘡瘍惡瘡；為末飲服治小兒疳瘦，長肌退熱、除蛔蟲；煎汁飲治消渴。」 蠶蛹中富含抗菌肽、複合氨基酸、殼多糖和硒元素等，在抗結核、抗高血 壓、抗腫瘤、抗衰老、提高免疫力等方面有較好的效果。 Ｃａｌｖｅｚ Ａｇｕｉ等研究表明，家蠶蛹可以開發成調節人體血糖的保健食品， 因為蠶蛹中ＭＨ和ＰＴＴＨ含量比較高。何家祿等也證實了蠶蛹具有降血糖 施新琴：家蠶和桑葉中１一脫氧野尻黴素含量變化的研究 蛹油是不飽和脂肪酸和飽和脂肪酸甘油酯的混合物，在治療高血脂症、動 脈硬化、肝炎、肝硬化等方面有一定的效果。 蠶蛹可提取出治療愛滋病的有效藥物成份、脫氧核苷酸鈉、維生素 Ｂ２等。以蠶蛹為寄主得到的蠶蛹蟲草也是近年來研究的一種頗有價值的 藥材，包括家（桑）蠶蛹蟲草Ｃｏｒｄｒｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ．和柞蠶蛹蟲草 Ａｎｔｈｅｒａｅａｐｅｒｎｙｉ。其成分尤為複雜，具有抗腫瘤作用。其抗腫瘤可能作用 於多靶點，因此對多種腫瘤細胞均有抑製作用。 蠶蛾含粗蛋白４８％、脂肪４１％、糖類５．４％，還含有豐富的核黃素和 礦物質。蠶蛾的藥用價值《本草綱目》中早有記載：「具有補腎壯陽、強 精益智等功效」。雄蠶蛾體內含有豐富的營養成分，其中含６０％左右的脂 類，主要是人體必需的不飽和脂肪酸酯（亞油酸、亞麻酸等）；３５％左右 的蛋白質和包括苯丙氨酸、亮氨酸等在內的２０種遊離氨基酸；５％左右的 糖類（主要是甘糖和海藻糖）以及各種維生素、微量元素。不飽和脂肪酸 酯具有預防動脈硬化和血栓疾病的作用，豐富的氨基酸可治療慢性腎衰、 燒傷、骨折、癌症、肝臟疾患、消化器官功能不全等疾病。此外，雄蠶蛾 體內含有的腦激素、前胸腺激素、蠶蛾素、利尿素等生物活性物質，對人 體代謝水準的調節及免疫功能的恢復有重要作用，在治療風濕、麻痹等方 面有一定的療效。大量性激素、細胞色素Ｃ、擬胰島素、攝護腺素及環腺 苷酸（ｃＡＭＰ）藥理實驗證實：蠶蛾對人體內分泌功能有很顯著的調節作 用，對治療攝護腺肥大、壯陽補腎有特效。 １．３利用蠶桑產品產物治療糖尿病 利用桑、蠶及其相關產物治療消渴病，在傳統中醫著作和國內外民間 驗方、秘方中早有記載。《本草綱目》中記載，桑葉「汁煎代茗，能止渴 消渴」，「灸熟煎飲，代茶止渴」。現代藥理學研究表明，桑葉可抑製血 糖升高，具有預防和治療糖尿病的作用。１９６３年Ｓｈａｒｔ等最早報導了桑葉 水提取液具有降血糖作用。１９７６年Ｙｏｓｈｉａｋｉ等首次從桑樹中分離到１一脫 氧野尻黴素（１－ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎ，ＤＮＪ）。２０世紀９０年代，Ａｓａｎｏ等（１９９４） 從桑葉中分離出６種生物鹼，Ｋａｔｏ（１９９７）確定了其結構。Ｋｉｍｕｒａ（１９９５） 等研究了以上６種化合物的降血糖效果，確認ＧＡＬ．ＤＮＪ和ｆａｇｏｍｉｎｅ降血 糖作用最強。已有的研究表明，桑葉的水提取物、醇提取物等均有降血糖和治療糖尿病的作用，其有效成分包括ＤＮＪ、桑葉多糖、黃酮類物質等。 中水氣，唾血，熱渴，水腫，腹滿腫脹，利水道，可以縫金瘡」。２０世紀７０年代從桑白皮中分離出ｍｏｒａｎｏｌｉｎｅ並證實它有降血糖的作用。蠶沙 是～種臨床常用的中藥材，中醫認為具有祛風出濕、活血定痛的作用。蠶 繭或繅絲湯具有滋陰潤燥、生精止渴作用，主治多飲、不生肌肉、』腎消白 濁和上中二消等疾病。 關於應用家蠶（全蠶粉）治療糖尿病，最早始於韓國學者的研究，１９９２ 年以來，Ｋａｎｇ Ｓｕｎ Ｒｙｕ等就蠶粉對人體的生理效應進行了系統研究，發現 ５齡第３天凍乾蠶粉的降糖活性最高，蠶品種、飼養季節和飼料等能影響 降血糖活性（Ｋａｎｇ ＳｕｎＲｙｕ，ｅｌａｌ，１９９９）。利用全蠶粉製作的降血糖製劑 已在韓國、泰國等國家上市，獲得了良好的評價，目前韓國飼養的蠶８０％ 以上用於生產治療糖尿病的藥物。國內學者也研究確認了蠶粉或蠶蛹粉的 降血糖效果，同時具有降血脂、抗疲勞等作用。崔為正等以全蠶粉為主要 成分研製的複合藥物，其降血糖效果明顯優於單純全蠶粉。從已有的研究 成果來看，全蠶粉的主要作用是通過其有效成分ＤＮＪ抑製小腸中二糖的 分解從而抑製了小腸對二糖的吸收，降低餐後的血糖值，從而起到降糖效 １－脫氧野尻黴素（１一ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎ，ＤＮＪ）及其測定方法的研究進展 １－脫氧野尻黴素（１一ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎＤＮＪ），是一種呱啶生物鹼，也是 一種天然糖的結構類似物，化學名為３，４，５－三羥基一２．羥甲基四氫吡啶 或（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）．２．（羥甲基）．３，４，５－三羥基呱啶，分子式為 Ｃ６Ｈ１３Ｎ０４，分子量１６３，分子結構如圖１。 施新琴：家蠶和桑葉中１一脫氧野尻黴素含量變化的研究 ＤＮＪ最早由Ｉｎｏｕｅ等人在研究抗生素時從鏈黴菌中發現，淺紫灰鏈黴菌的～些發酵液中也產生ＤＮＪ。２０世紀７０年代，Ｙｏｓｈｉａｋｉ等（１９７６）首 次從桑樹根和樹榦中分離到ＤＮＪ。２０世紀９０年代，Ａｓａｎｏ等（１９９６）從 桑葉中分離出６種生物鹼，Ｋａｔｏ（１９９７）確定了其結構。 ＤＮＪ對人和動物具有多方面的藥理作用。第一，ＤＮＪ及其衍生物能 高效抑製小腸微絨毛上的蔗糖酶、麥芽糖酶、異麥芽糖酶、海藻糖酶和乳 糖酶，但不抑製ｃ【．澱粉酶，從而能延緩食物中碳水化合物的吸收，可用於 治療糖尿病和肥胖症，而不會引起糖吸收障礙等副作用。第二，ＤＮＪ及其 衍生物對ａ．１，６一葡萄糖苷酶活性有迅速且完全的抑製作用，從而抑製糖 原分解，減少心肌乳酸的積累，降低因酸中毒引起的心肌梗死發生率。第 三，ＤＮＪ能抑製糖蛋白加工過程，通過改變ＨＩＶ－Ｉ病毒的ｇｐ」ｏ蛋白的糖 基化，可以阻斷ＨＩＶ－１誘導的合體細胞的形成，從而具有抗愛滋病毒感染 的作用。此外，據Ｔｓｕｌｏｍｕ等研究，ＤＮＪ還能抑Ｎｄ鼠Ｂ．１６肺黑色細胞 腫瘤的轉移。 由於ＤＮＪ及其衍生物具有以上多種藥理、生理作用，是設計新葯、 研究糖蛋白成熟機制及某些生化途徑的有效工具，在臨床治療糖尿病、愛 滋病等重大疾病方面及生化和分子生物學研究方面都具有重要而廣泛的 應用價值，尤其在治療糖尿病方面的獨特作用已引起醫學界的關注。 有鑒於此，近年來對ＤＮＪ的來源進行了較為廣泛的研究，普遍認為 其主要來源可以分為植物和微生物來源。使蠶體內積累了大量ＤＮＪ，其含量又遠高於桑葉中的 含量，ＮａｏｋｉＡｓａｎｏ等研究表明ＤＮＪ在蠶粉裡的含量是桑葉含量的２．７倍 還要多，因此家蠶是天然的降血糖藥物，也是目前發現的唯一含有ＤＮＪ 的動物。 同時對ＤＮＪ的合成作了多方面的研究，ＤＮＪ分子中含多個手性中心， 製各方法比較複雜，可有多種途徑進行合成（如Ｎ．甲基．１．脫氧野尻黴素）。 考慮ＤＮＪ含有的４個手性中心，在合成中主要有３個途徑即以Ｌ一山梨糖 或Ｄ一葡萄糖為起始原料的化學合成法，以非葡萄糖、非山梨糖為原料的 化學合成法，微主物轉化法，微主物轉化與化學合成相結合的製備法。最 早使用的是化學合成法，從２０世紀８０年代開始，出現了以微生物轉化法 和化學合成法相結合的製各方法。其特點是避免 了化學合成反應中加保護基團和去保護基團的複雜過程，大大縮短了製各 周期。現已合成出了多種衍生物，其中Ｎ．羥己基一１．脫氧野尻黴素（米格列醇）具有最佳降血糖 效果，己於１９９８年在法國、德國、奧地利等國家作為治療糖尿病藥物應用於臨床。