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【指南速覽】兒童肺炎支原體呼吸道感染實驗室診斷中國專家共識

本共識規範了兒童呼吸道Mp感染的實驗室診斷方法的類型、概念和價值,旨在根據患者現症和既往、門診和住院、篩查和確診等不同的感染情況選擇不同的檢測方法,結合患者臨床癥狀、體征以及X光等其他輔助檢查,同時對患者年齡、全身狀況、用藥、病程等綜合判斷,為臨床Mp感染的診斷提供合理、經濟、高效的參考建議。經歸納總結形成Mp實驗室診斷流程圖,見圖1。

註:紅色示確診方法;紫色示初篩陽性,確診需要病原學檢測;黃色示療效或複發評估

▲圖1 Mp呼吸道感染實驗室診斷流程圖

本共識涵蓋病原學檢測、血清學檢測、葯敏試驗和耐葯基因檢測、肺炎支原體檢測的質量控制等內容,本處僅就檢驗前的質量控制展開闡述,感興趣讀者可訂閱中華檢驗醫學雜誌2019年第七期進行全文閱讀。

肺炎支原體檢測的質量控制

Mp檢測的質量控制是獲得準確可靠結果的前提,檢驗的質量控制從檢驗前、中、後質量控制三部分闡述。

(一)檢驗前質量控制

檢驗前質量控制主要是樣本採集、運輸、保存過程的質量控制和標準化,應作為重點培訓和規範內容推廣。

病原學檢測標本採集儘可能採集多種類型的標本和(或)連續多個時間點採集不同部位的標本,以滿足最低檢測閾值採集量、陽性率和多種檢測方法聯合檢測的需求。咽、鼻、喉拭子最易獲得,痰液需判斷是否合格,肺泡灌洗液的雜菌汙染較少,不同標本的病原學檢測靈敏度和特異性研究報導不一致,40%~80%不等,晨痰對呼吸道支原體的檢測價值較高,可依據臨床實際情況選擇,具體操作規範見表1。用做核酸檢測的樣本容器不可含核酸酶,以防止核酸降解;容器內應預裝具有防核酸降解功能的保存液,有利於標本保存和轉運。呼吸道標本室溫下30 min內送檢,4 ℃環境下2~4 h內送檢,標本4 ℃保存不應超過48 h,預計延遲送檢的標本應在-70 ℃條件下保存。血液應儘可能採集急性期和至少間隔2周的恢復期雙份血清。

病原學檢測

咽拭子

塑料柄的尼龍拭子、滌綸拭子、植絨拭子(可吸附更多的生物樣本並達到較高的釋放率)或人造棉拭子(不要採用帶木柄的棉花拭子,因為後者可能含有抑製支原體生長及抑製分子反應的成分)

採集前用生理鹽水漱口,讓患者頭部微仰,囑其張口發"啊"音,必要時使用壓舌板輕壓舌面,暴露咽喉,手持消毒拭子,以靈敏而輕柔的動作擦拭兩側齶弓、咽、扁桃體上的分泌物及上皮組織,稍微用力來回擦拭至少3次,然後再在咽後壁上下擦拭至少3次;取畢,將拭子插入試管,或放入適宜的保存液中,塞緊管口,註明標本採集時間,立即送檢。洗脫時將拭子頭浸入採樣液中,把拭子頭部與管壁接觸數下,使標本盡量多地沖洗到採樣液中。最好在使用抗菌藥物治療前採集標本。咽拭子必須保持濕潤

樣本採集注意事項:觀察患者口腔黏膜、咽喉部有無紅腫、潰瘍、膿性分泌物等情況,採集前讓家長、患者知曉採集部位及目的,並獲得其積極配合
鼻、喉拭子 觀察鼻、喉部黏膜,余同上 直接擦拭鼻、喉部黏膜,次數及其他同上,立即送檢
肺泡灌洗液 無菌瓶 肺泡首次灌洗液用於病原學檢查效果優於第2次及第3次灌洗液的效果。無菌操作,立即送檢
胸腔積液 無菌瓶 抽吸法採集,立即送檢
無菌瓶(集痰器) 抽吸採集、自然咳出採集前用生理鹽水漱口,立即送檢;晨痰最佳
血清學檢測 末梢血 末梢抗凝管 新生兒選取足跟內側緣或外側緣部位采血:≥29 d的患者選擇左手無名指指尖尺側采血(具體參考2018年《中國末梢采血操作共識》)
靜脈血 血清管、血漿管、全血抗凝管 血清、血漿或全血的採集嚴格按照CLSI(GP41A6)執行

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