醫藥研發技術和新藥研究息息相關，新的設計酶CRISPR/Cas9 RNA引導的核酸酶系統引起了科學家的興趣，這是一種提供直接攻擊B肝病毒基因組的先進技術，我們就來談談B肝病毒和CRISPR/Cas9近幾年所遇到的一些技術路徑問題和潛力。
B肝設計酶，未來開發前景，應識別各種HBV及最小脫靶效應
B肝病毒（HBV），是嗜肝病毒科的成員之一，嗜肝病毒科是具有松弛環狀DNA（rcDNA）基因組的小型非細胞病變病毒家族。當感染後，rcDNA基因組在感染細胞的細胞核中，轉化成為了共價閉合環狀DNA（cccDNA）。B肝病毒把人類當成了其唯一的天然宿主，幾乎隻感染肝細胞。
HBV基因組，包含4個重疊的開放閱讀框（ORF），它們通過使用替代起始密碼子編碼7種病毒蛋白。HBV X（HBx），它是HBV編碼蛋白之中最小的，存在所有的哺乳動物嗜肝病毒當中。HBx通常被認為是一種非結構蛋白，而且已經被科學家證明，在HBV生命周期、病毒-細胞相互作用以及HBV相關的HCC中發揮著多種功能意義！
難點：當我們了解HBV主要結構以後，以現有抗病毒藥物還無法治愈HBV感染。因為要想成功根除HBV，則需要滅活病毒基因組，該基因組主要以遊離共價閉合環狀DNA（cccDNA）形式，存在於宿主細胞之中，在較小程度上，會以染色體整合序列的形式存在。
尚待解決問題：對設計核酸酶的未來開發應用前景，必須能夠識別各種B肝病毒基因型，並且可以導致最小的脫靶效應才行。包膜HBV的基因組，包含一個環狀、部分雙鏈DNA，它是使用逆轉錄酶從RNA中間體合成。目前為止，科學家已經發現了HBV基因組中，有8種主要基因型（A至H），在HBV感染細胞中，病毒遺傳信息，就是人們熟知的以cccDNA（共價閉合環狀DNA）形式存在附加體中，在人類基因組中以整合DNA形式存在著，上面也有提到。
而且這種病毒庫還特別持久，讓HBV治療變得相當困難。現有主要有兩種被科學家認可的方法，即干擾素-α和核苷（酸）類似物。干擾素-α，主要有價格昂貴，可能會導致嚴重不良反應等；核苷（酸）類似物通常需要長期甚至終身給藥，並且可能會發生基因逃逸突變。
多數核苷（酸）類似物可以接近病毒抑製，但還不能從體內完全地消除HBV，這主要是因為B肝病毒DNA也是肝細胞DNA的一個組成部分。藥物研發人員要想開發設計出，完全治愈HBV感染，就必須根除或至少大量減少受到感染肝細胞中的cccDNA。
小番健康結語：到目前為止，隻關注到，要想實現大量減少感染肝細胞中cccDNA的方法，可能會和其他在研新藥物結合使用，比如免疫調節劑、小分子抗病毒抑製劑、RNAi等等。科學家在過去幾年中，已經至少開發了三種新技術，比如鋅指核酸酶 (ZFN)、轉錄激活因子樣效應核酸酶 (TALEN)和最近人們熱議的CRISPR/Cas9 RNA引導的核酸酶系統。
潛力：實際上，科學家已經在不同的測試系統中，通過使用ZFNs、TALENs和CRISPR/Cas9，實現了對HBV的直接抗病毒作用。但是，正如最近小番健康介紹的，這些新技術還有一些技術路徑問題沒有解決，除了核酸酶的最佳傳遞與循環HBV毒株中最理想靶位點保護，以及潛在的脫靶效應的高度相關問題。
這是一種好的潛在直接靶向cccDNA方法，但科研人員還要解決上述問題，才可能實現藥物從臨床前進入臨床研究。返回搜狐，查看更多
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