B肝cccDNA藥物篩選，衣殼組裝調節劑，干擾模板生物合成_細胞

公開日: 2021-01-22

在阻斷新的cccDNA分子形成方向，此前小番健康介紹了一種在研B肝新藥病毒進入抑製劑Myrcludex B。它除了抗HBV活性外，實際上，還能夠破壞NTCP的膽汁酸轉運蛋白功能，曾經在其臨床試驗結論中，可見到在一些接受治療患者中，膽汁酸水準無症狀地升高。

B肝cccDNA藥物篩選，衣殼組裝調節劑，干擾模板生物合成

在Myrcludex B曾經發表過的科研文獻中，負責該藥的科研人員利用了細胞培養感染系統，鑒定出環孢素a (CsA)衍生物可與NTCP相互作用，可抑製B肝病毒進入，而不會干擾NTCP的轉運功能。這個發現表明，NTCP的HBV受體功能可能是被選擇性地靶向，以避免發生和抑製宿主功能相關的潛在副作用。還有基於阻斷新cccDNA分子形成方向，但對其抑製機制和作用靶點，目前還未闡明。

比如，在B肝病毒附著之後，肝細胞通過內吞攝取HBV，已有科研人員證明是小凹蛋白依賴的，而在永生化原代人肝細胞(PHH)和HepG2細胞中是網格蛋白依賴的。網格蛋白介導的內吞抑製劑，例如水飛薊賓和氯丙嗪，能夠阻止HBV的吸收。通過從頭感染和細胞內循環途徑，合成新的cccDNA拷貝，都需要將rcDNA轉化成為cccDNA。

上述這一步驟涉及到許多宿主酶，包含DNA修複酶TDP2或tdp相關蛋白、瓣結構特異性內切酶1 (FEN1)、DNA聚合酶α(Polα)和kappa (POLK)、DNA拓撲異構酶I (TOP1)和II (TOP2)和DNA連接酶。這些酶的化學抑製和siRNA或CRISPR/cas9介導的表達下調，抑製了cccDNA的擴增。而在對直接靶向cccDNA的化合物篩選時，目前已有2種雙取代磺胺(DSS) CCC-0975和CCC-0346，被鑒定為rcDNA轉化為cccDNA的特異性抑製劑。

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假如，使用上述類似的篩選方法，科研人員還發現可水解單寧能抑製cccDNA形成，並促進其降解。但是，正如前面小番健康所提，DSS和水解單寧的抑製機制和作用靶點尚不清楚。衣殼組裝調節劑(CAMs)或稱為衣殼抑製劑，是另一類干擾cccDNA生物合成藥物。這些分子，以B肝病毒的核心蛋白（HBc）作為靶點，有的是誘導與核結合的衣殼過早解體，有的是通過阻止新合成的pgRNA被包衣。

因為抑製這些過程，都可以實現抑製rcDNA產生與傳遞到細胞核，以及隨後轉化為cccDNA。所以，衣殼組裝調節劑(CAMs)也被全球科研人員寄以有前景的B肝藥物開發方向。以上是小番健康介紹的藥物開發方向一大類，即阻止新的B肝病毒複製模板cccDNA形成，還有一個方向是：從被感染的肝髒中清除cccDNA。

要想根除HBV感染，清除cccDNA可以通過殺滅感染肝細胞或通過促炎細胞因子和DNA靶向酶作用，以非細胞溶解方式實現。比如，宿主先天和適應性免疫應答，可通過自然殺傷細胞與細胞毒性T淋巴細胞清除感染的肝細胞，從而降低肝髒中的cccDNA水準。目前這個方向的科研項目已有，但存在一定的爭議。比如，一些細胞因子，IFN-α、IFN-γ、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，以及淋巴因子-β受體(LT-βR)的激活，可通過激活核脫氨酶APOBEC3A和3B誘導cccDNA降解而不引起細胞死亡。

以上是以往曾經報導的該方向科研進展，但是，因為研究使用的檢測方法中技術受到限制，細胞因子能夠誘導cccDNA非細胞病變性丟失的說法存在爭議，且需要獨立進行論證，主要原因是可能對HBV治愈有著重要意義。慢性B肝患者通常缺乏或存在HBV特異性免疫缺陷，需要免疫調節治療，進而產生有效的抗病毒應答。返回搜狐，查看更多

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