B肝寡核苷酸類藥物，Replicor科學家介紹，ASO/siRNA作用機制_HBsAg_反應_GalNAc-ASO

生物製藥公司（Replicor）的科學家在最近一次科學會議上，進一步描述了解寡核苷酸類藥物在慢性HBV感染中的作用機制。

寡核苷酸療法對循環HBsAg的影響

B肝寡核苷酸類藥物，Replicor科學家介紹，ASO/siRNA作用機制

研究人員認為，對合成干擾RNA（siRNA）治療反義（ASO）過程中對B肝表面抗原（HBsAg）的調降機制理解，主要受到齧齒動物體內模型限制、不同的傳遞途徑對寡核苷酸在實質細胞和非實質細胞中積累影響、寡核苷酸的免疫刺激特性以及寡核苷酸修飾如何影響這些特性。考慮到這些變量，在科學會議上提出了迄今為止，這些B肝候選藥物對 HBsAg 反應的全球分析。

結果表明，人體對 GalNAc-ASO 和 GalNAc-siRNA 的藥效學反應和 ASO/siRNA 效應劑量飽和度沒有區別。單點突變同樣會消除 ASO 和 siRNA 的活性。因此，HBsAg 對 ASOs 的反應告知了 HBsAg 對 siRNA 的反應機制，反之亦然。HBV感染在基因上具有高度可塑性，允許 ASO 和 siRNA 逃逸突變體的快速進化。HBV感染的這一特徵僅在鴨和土撥鼠中得到很好模擬。

LNP-siRNA治療WHBV感染土撥鼠過程中病毒血症的反彈(Tekmira DIA 2015)

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在對 WHV 感染的土撥鼠進行 LNP-siRNA 治療過程中，病毒血症的反彈表現出具有多個觸發器的逃逸突變體的快速進化。這在經核苷（酸）類似物（NAs）抑製的慢性HBV感染中得到證實，在 S 和 X 中結合了三個 LNP-siRNA 觸發器（ARB-1467）。

經核苷類抑製TKM-HBV的慢性HBV病毒血症反彈(ARB-1467) (AASLD 2017)

siRNA 從 LNP 到 GalNAc 結合的轉變驅動雙鏈RNA（dsRNA）大量暴露於非室間細胞(竇內皮細胞[LSECs]和Kupffer細胞[KCs])，引發更強的 TLR3 激活。

siRNA對TLR3的刺激與序列無關。寡核苷酸修飾降低TLR反應性也阻斷了RISC負載和RNAi效應

在第一劑 GalNAc-共軛siRNA 或 GalNAc-共軛 ASOs 後15天，肝髒靶蛋白高度保守地下降 90%，這在許多肝髒靶點的臨床中已得到證實，但在 siRNA 和 ASOs 的 HBsAg 中都沒有出現這種情況。

臨床研究中觀察到的HBsAg對以寡核苷酸為基礎的治療的反應總結

HBsAg 對目前正在開發的所有 GalNAc RNAi（AB-729、JNJ-3989、VIR-2218、RG6346）的反應同樣高度且普遍延遲。與小鼠中 dsDNA 介導 TLR3 刺激的延遲 HBsAg 反應一致。HBsAg亞型反應現實 S-HBsAg 沒有選擇性下降，這表明HBV亞病毒顆粒不受 siRNA 的影響。以AB-729為例，未觀察到與 SVP 靶向一致的選擇性 S-HBsAg 亞型下降。M-和L-HBsAg的選擇性下降，表明cccDNA失活或自噬增強（EASL2021）。在使用相同檢測平台的臨床研究中，使用核酸聚合物（NAP）可觀察到選擇性 S-HBsAg 下降。

HBsAg對 Gal-NAc siRNA的亞型應答

葛蘭素史克公司與 Ionis Pharmaceuticals 合作研發的 Bepirovirsen（GSK836）是一種未偶聯非結合ASO，包含 II類CpG motif (TLR9刺激），70%的肝劑量積聚在非實質肝細胞。GSK836是一種完全磷酸化的寡核苷酸，通過末端的2'MOE修飾阻止TLR7/8的刺激，並在其無保護的DNA核心中包含 TLR9 刺激基序，與 TLR9 刺激一致的免疫活性發生在 Bepirovirsen。

這種寡核苷酸（GSK836）在非實質細胞中的積累導致 HBsAg 強烈下降，宿主介導的轉氨酶耀斑僅限 HBsAg 較低受試者（HBsAg < 1000 IU/mL）。當這種寡核苷酸是通過 GalNAc 偶聯結合技術開發（指GSK3389404）作用於肝細胞時，上述這種作用就不存在了。

bepirovirsen的奇特案例

小番健康結語：這是Replicor公司在最近一次科學會議上，詳細介紹寡核苷酸藥物在慢性HBV感染中的作用機制。Replicor公司科學家的結論是，在體內試驗和臨床開發數據表明，HBsAg 對 siRNA或ASO 的應答是由先天免疫刺激驅動的！飽和的B肝表面抗原水準隨著siRNA而下降，這反映了來自整合HBVDNA的HBV亞病毒顆粒（SVP）的持續存在，在評價這些新機制候選藥物時（siRNA或ASO），必須把它們的免疫反應特性考慮在內。返回搜狐，查看更多

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